重组别藻蓝蛋白对小鼠h22肿瘤生长及cox2、

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1、重组别藻蓝蛋白对小鼠H22肿瘤生长及COX2、【摘要】目的观察重组别藻蓝蛋白（rAPC）对接种H22细胞小鼠的肿瘤生长及环氧化酶2（COX2）、血管内皮生长因子（VEGF）、增殖细胞核抗原（PA）表达的影响，并初步探讨其可能的机制。方法昆明小鼠随机分为5组（n=10），即模型组,rAPC低、中、高剂量组（25、50、100mg·kg-1·d-1）,环磷酰胺组（CY对照组）。各组小鼠左前腋下皮下接种H22肝癌细胞，第2天除模型组外，其余4组分别以不同剂量的rAPC、CY灌胃，15d后处死，剥离出肿瘤，称质量，计算抑瘤率；

2、用免疫组化法测定肿瘤组织中COX2、VEGF和PA的表达。结果rAPC低、中、高剂量组小鼠H22肿瘤质量增长均较模型组缓慢，差异有显著性（F=8.926,q=3.794～7.684,P<0.05、0.01），其抑瘤率分别为25.2%、36.7%、43.1%。rAPC各剂量组COX2、VEGF阳性表达均低于模型组（F=23.651、7.244,q=3.985～11.307,P<0.01）;rAPC中、高剂量组PA阳性表达较模型组显著减少（F=164.380，q=1.513～31.265,P<0.01）。结

3、论rAPC可以抑制小鼠H22肿瘤的生长及COX2、VEGF和PA的表达。【关键词】别藻蓝蛋白；肝肿瘤；环氧化酶2；血管内皮生长因子；增殖细胞核抗原；小鼠　［ABSTRACT］ObjectiveToobservetheeffectofrebinantallophycocyanin(rAPC)ontumorgroiceandapproachitspossiblemechanism.MethodsKunmingmiceizedtofivegroupsasthemodelgroup,loiddle,andhighdoserAP

4、Cgroups(25,50,100mg·kg-1·d-1,respectively),andCyclophosphamidegroup(controlgroup)iceineachgroup.H22cellspitofthemice.Animalsofthefourgroups,exceptthemodelgroup,orsoved,orinhibitionratecalculated;theexpressionsofCOX2,VEGFandPAinthetumorinedimmunohistochemically.Re

5、sultsTheincreaseoftumoriddle,andhighdosegroupsodelgroup(F=23.651;q=4.476-11.307;P<0.01),theexpressionofPAinmiddleandhighdoserAPCgroupsodel(F=164.380;q=1.513-31.265;P<0.01).ConclusionrAPCinhibitstumorgroice.　　［KEYBP）标签的重组别藻蓝蛋白(rAPC)。已有研究表明，rAPC对小鼠S180肉瘤及H2

6、2肝癌模型均具有显著的抑制效果[3]，但其抗肿瘤活性的机制仍未知。环氧化酶2（COX2）是一种诱导酶，多数恶性肿瘤COX2过度表达，且其表达水平与肿瘤的发生、发展、预后和转移有密切的关系。血管内皮生长1期徐清燕，梁惠，秦松.重组别藻蓝蛋白对小鼠H22肿瘤生长及COX2、VEGF和PA表达的影响23因子(VEGF)和增殖细胞核抗原（PA）可促进肿瘤间质血管的生成，也是导致肿瘤细胞不断生长繁殖，进而产生浸润转移的原因之一。本文应用动物实验及免疫组织化学的方法，研究rAPC对昆明小鼠H22肿瘤组织中COX2、VEGF及P

7、A表达的影响，并初步探讨其可能的机制，以寻找具有高度生物活性的新的海洋药物。　　1材料与方法　　1.1材料　　1.1.1rAPC由中国科学院海洋研究所提供。　　1.1.2实验动物及瘤株　　清洁级昆明小鼠50只，体质量18～23g，雄性，由青岛市实验动物中心提供。小鼠肝癌细胞株，由中国医学科学院药物研究所引进，山东省医学科学院药物研究所药理室低温冻存保种，复苏后传5、6、7代的细胞悬液。　　1.1.3主要试剂　　新生牛血清，购自Gibico公司。兔抗人COX2抗体、兔抗人PA抗体以及兔抗人VEGF抗体，均购自青岛宏达通生物技

8、术有限公司。DAB显色试剂盒、SP染色试剂盒均购自北京中山生物技术有限公司。注射用环磷酰胺（CY，每瓶0.2g），江苏恒瑞医药股份有限公司生产。　　1.1.4仪器　　LEICARM2135切片机(德国)，ZMN7803型自动组织包埋机(常州华利电子公司产品)，生物图像分析系统(江苏捷达科