fnc对荷h22小鼠肿瘤的抑制作用及其机制研究

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1、AthesissubmittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMaster砀eAntitumorEffectandtheMechanismofFNCinH22Tumor—bearingMiceBy:SunaLiuSupervisor:Prof.QingduanWangPharmacologyBasicalMedicalCollegeMay2012原创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表

2、或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。学位论文作者:日期:年月日学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品,知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅;本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时

3、,第一署名单位仍然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。学位论文作者:日期:年月摘要FNC对荷H22小鼠肿瘤的抑制作用及其机制研究研究生:刘素娜导师:王庆端郑州大学基础医学院药理学教研室河南郑州450052背景和目的:目前,恶性肿瘤仍是世界上对人类健康危害最大的疾病之一。世界卫生组织最新统计数据显示,目前全球平均每8个死亡病例中就有1人死于癌症。我国卫生部数据显示,中国内地每年新发癌症约200万例,死亡超过140万例,每5位死亡病人中有一人死于癌症。虽然现有许多种化疗药物,但都存在着自身的治疗局限性及毒副作用。因此,开发安全有效的抗肿

4、瘤药物是一项紧迫的任务。烈C(2’.脱氧.2’.氟.4’.叠氮胞苷)是一种新型的核苷类似物。我们前期的研究结果表明,多种人癌细胞经高剂量(2mg/kg)和低剂量(O.5mg/kg)FNC处理后,细胞周期被阻滞于G1期或S期,并诱导其凋亡。FNC能够在体外抑制多种人癌细胞的增殖,包括B细胞非霍奇金淋巴瘤、肺腺癌和急性髓细胞白血病等。有关FNC这些作用的确切分子机制尚不清楚。众所周知,细胞周期调控因子的异常表达可以通过改变细胞周期引起细胞无限增殖而导致癌症的发生,异常的细胞周期进程是肿瘤发生的重要因素。通常,大部分肿瘤的形成都源于细胞周期G1

5、/S转换期出现了问题。本研究的目的是建立肝癌H22荷瘤小鼠模型,研究FNC对荷H22小鼠肿瘤的抑制作用,并进一步探讨其抗肿瘤的分子机制,为其开发为临床抗肿瘤治疗药物提供理论基础。材料与方法:本课题采用建立肝癌H22荷瘤小鼠模型,连续尾静脉注射FNC8天后剖瘤摘要称重,计算抑瘤率:以cyclinD1、cyclinE和Rb为指标,分别测量瘤体内cyclinD1、cyclinE和Rb的基因和蛋白表达量的变化,初步研究其抗肿瘤作用及分子机制。本研究共分两部分,其内容如下:第一部分FNC对肝癌H22实体瘤的抑制作用用传代良好第7。8天的H22瘤细胞

6、接种于KM小鼠右腋下,每只动物接种2.4x106个细胞,24h后随机分为空白对照组(生理盐水)、5FU(15mg/kg)、FNC低(1mg/kg)、FNC中(2mg/kg)、FNC高(3mg/kg)剂量组,连续尾静脉用药8天后剖瘤称重计算各组的抑瘤率,抑瘤率(%)=(对照组平均瘤重一用药组平均瘤重)/对照组平均瘤重x100%,评价FNC体内的抗肿瘤疗效。第二部分FNC体内抗肿瘤作用的分子机制研究用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测瘤组织内细胞周期蛋白cyclinD1、cyclinE和抑癌蛋白RbmRNA的表达量:用荧光倒置显微镜检

7、测瘤组织内cyclinD1、cyclinE和磷酸化Rb(ser780)蛋白的表达量,从而探究FNC在基因和蛋白水平上对cyclinD1、cyclinE和Rb(ser780)表达产生的影响。结果:1:通过计算抑瘤率,FNC(1,2,3mg/kg)和5FU(15mg/kg)对荷瘤小鼠肝癌H22抑瘤率依次为45.96%、52.53%、62.12%and63.13%。2:FNC各剂量组瘤体内eyclinD1mRNA的表达均低于空白对照组,大剂量(3.0mg/kg)组与空白对照组比较有显著性差异(p<0.05)。FNC各剂量eyclinEmRNA的

8、表达都高于空白对照组,并随药物浓度的升高而升高,大剂量组与空白对照组比较有显著性差异(p

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