含前S表位重组HBsAg联合重组HBcAg的免疫原性研究-论文.pdf

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1、国际生物制品学杂志2014年4月第37卷第2期IntJBiologicals．Aoril2014．Vo1．37．No．2·53··论著·含前S表位重组HBsAg联合重组HBcAg的免疫原性研究张鹏艳丁显平叶琳谭昌耀【摘要】目的研究含前s表位重组HBsAg(SS1s2)与重组HBcAg(C)联合免疫BALB／c小鼠的体液和细胞免疫应答。方法用纯化的SS1S2与c分别配制含或不含Al(OH)佐剂(A1)的疫苗。采用简单随机法将雌性BALB／c小鼠分为5组：阴性对照(NC)、SS1s2、SS1S2+C、SS1s2+A1、SS1s2+c+Al，

2、各组分别于0和21d进行腹腔免疫，对照组注射磷酸盐缓冲液。初免及加强后1周各取一半小鼠采血，采用ELISA法测定抗-HBs、抗一前S1、抗一前s2和抗．HBc滴度；常规制备脾淋巴细胞，用酶联免疫斑点法测定分泌IFN-的T细胞频数。采用t检验对各组结果进行比较。结果联合HBcAg的疫苗组均产生了较高水平的抗一HBs、抗一前S1、抗．前S2和抗．HBc。初免后1周，SS1s2+C组的抗-HBs阳转比例(1／5)高于SS1s2组(0／5)、SS1s2+Al+C组(4／5)高于SS1s2+Al组(3／5)；SS1s2+C组的抗-前s1阳转比例(

3、3／5)高于SS1S2组(0／5)；HBcAg对抗．前S2的产生无影响。加强免疫后，各疫苗组的抗体滴度均升高，联合HBcAg的疫苗组各抗体滴度明显高于SS1S2疫苗组。各组疫苗免疫后均可诱导细胞免疫应答，初免后SS1s2+C和SS1s2+Al+C组分泌IFN一的T细胞频数显著超过SS1s2和s1s2+Al组(t值分别为2．926、2．974，P值均<0．05)；加强免疫后，各组均有加强效应，SS1S2+C组的T细胞频数明显超过SS1s2组(t=4．604，P=0．010)。结论SS1s2联合HBcAg可在BALB／c小鼠中诱导较强的免疫

4、应答，HBcAg可增强SS1s2诱导的体液及细胞免疫应答。【关键词】肝炎表面抗原，乙型；肝炎核心抗原，乙型；免疫原性；免疫，体液；免疫，细胞ImmunogenicityofrecombinantHBsAgcontainingPreSepitopescombined、订threcombinantHBcAgZhangPengyan，DingXianping，YeLin，TanChangyao．*KeyLaboratoryofBio—resourcesandEco—environmentofMinutryofEducation，Schoolo

5、fLifeSciences，SichuanUaive~ity，Chengdu610064，China；Bio—TechnologyResearchLaboratory，ChengduInstituteofBiologicalProductsCo．，Ltd．，Chengdu610023，ChinaCorrespondingauthor：DingXianpin，Email：brainding@$CU．edu．ca；YeLin，Email：yelincd@hotmail．con_【Abstract】ObjectiveTostudyhumora

6、landcellularmediatedimmuneresponse(CMI)torecombinantHBsAgcontmningPreSepitopes(SS1s2)combinedwithrecombinantHBcAg(C)inBALB／cmice．MethodsFemaleBALB／cmiceweredividedinto5groupsbyasimplerandommethodandintraperitoneallyimmunizedwithSS1S2，SS1S2+C，SS1$2+A1(OH)3(A1)andSS1S2+C+A

7、l，respectively，atdays0and21．PBSwasusedascontro1．Bloodandspleenweretaken1weekafterprimaryandboostinjections．Serumtitersofanti—HBs，anti-PreS1，anti-PreS2andanti—HBcweredetectedbyELISA．Spleen-lymphocyteswereisolatedand~equencyofIFN一一secretingTcellswasmeasuredbyenzyme—linkedi

8、mmunospotassay．Theresultswereanalyzedbyt-test．ResultsHighlevelsofanti-HBc，anti-HBs，anti—PreS1andanti·Pr