EML4-ALK融合基因在非小细胞肺癌中的研究-论文.pdf

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1、临床肺科杂志2014年1月第l9卷第1期l33EMIA．ALK融合基因在非小细胞肺癌中的研究朱小鹏徐炎华肺癌全球每年新增病历约160万，其中非小细聚合酶链反应(reversetranscriptionpolymerasechain胞肺癌(NSCLC)占80％～85％⋯。EMIA—ALK在reaction，RT—PCR)、免疫组化(immunohisiochemistry，肺癌中的阳性率大致约7％_2J，与表皮生长因子受IHC)、荧光原位杂交(fluorescenceinsituhybridiza·体(EGFR)、KRA

2、S基因突变很少同时存在。针对这tion，FISH)、显色原位杂交(chromogenicinsituhy—一NSCLC新的靶点，本文就EMIA—ALK及其特征、bridization，CISH)、快速cDNA末端扩增聚合酶链致病机制、检测方法，以及其临床特征和治疗等综述反应(rapidamplificationofeDNAendspolymerase如下。chainreaction。RACE．PCR)。最早检测ALK融合基因的是FISH及RT—PCR技术。由于ALK在正常肺EMIA、ALK、EMIA-ALK简介组织中表

3、达极低，与EMIA融合后ALK表达增高，EMIA位于人类染色体2p21，由三部分组成：氨故也可以通过免疫组化的方法。CISH弥补了FISH基酸末端碱基区、疏水的棘皮动物微管相关蛋白区、无法同时观察组织学形态的不足。RACE—PCR技术WD重复区；ALK位于人类染色体2p23，含29个外是吴一龙教授课题组Zhang等分析ALK基因融显子，全长728kb，具有RTK三个部分：跨膜区、胞外合变异的新技术。现在还没有统一的检测EMIA—区、胞浆内激酶催化区。ALK以基因的融合、突ALK融合基因金标准，5种检测技术各有长短，怎样

4、变、扩增及蛋白表达增加的形式表现异常，ALK与利用这些检测技术以提高准确性、灵敏性、特异性尚EML4融合成EMIA—ALK。2007年日本学者Soda需要进一步的研究。等在Nature卜首次报道1例62岁有吸烟史的男一、RT—PCRRT—PCR是Soda等最早用于性肺腺癌患者的肿瘤组织中存在EMIA和ALK基NSCLC患者病变组织EMIA—ALK融合基因的检测因融合而形成的具有恶性转化和致瘤性的变异基因技术。该技术灵敏度较高，并可用于EMIA．ALK融一EMIA-ALK。合基因亚型的鉴别。可以用患者病变的石蜡组织进EM

5、IA分别在l3号、6号、20号、l4号、l8号、行检i贝0，由于基因的扩增暗示存在ALK的重排，因l5号、2号、l7号外显子处发生断裂形成片段，其均而存在一定的假阳性。因为RNA容易降解，所以在与ALK的20号外显子的断裂处相结合，形成El3；取标本时要迅速将离体标本放入液氮或一80％中保A20、E6；A20、E20；A20、El4；A20、E18；A20、El5；存，而且取标本的器械最好是用DEPC水(diethypy．A20、E2；A20、E17；A20，其中在NSCLC中E13；rocarbonate焦碳酸二乙酯

6、，经过处理并给予高温、高A20、E6；A20这两种变异体最常见_5J，分别占33％压消毒的超纯水)处理过。故为提高准确性，建议和29％。EMIA—ALK融合过程中破坏了ALK稳定用新鲜冰冻的组织标本做RT—PCR检测。细胞增殖及EMIA维持细胞结构的功能，激活二、IHCIHC是常规病理检测的主要方法，能ALK基因片段以及与细胞增殖相关的信号通路：PI3对肺癌的相关抗原进行定位及定性J，它可以不破一K／Akt、PLC一~／／PIP2、Ras—MEK、STAT3／5等，坏正常组织和肿瘤组织的细胞、组织固有的形态结导致细胞异

7、常增殖，发生恶变。构、特征。由于ALK在肺癌组织中表达水平较低，EMIA-ALK融合基因的检测方法灵敏度较低，其检测的阳性结果存在主观性，必须使用FISH技术来确定。Mino．Kenudson等使用CSTEMIA-ALK融合基因有5种检测方法：逆转录公司新型抗体一兔单克隆抗人CD246抗体(D5F3)doi：10．3969／j．issn．1009—6663．2014．01．050检测153例肺腺癌患者(22例为ALK融合，131例作者单位：1．434000湖北荆州，长江大学医学院为ALK野生型)病变组织ALK融合蛋白表

8、达，并使2．434000湖北荆州，华中科技大学同济医学院附属荆用FISH技术对其结果进行验证，结果显示其敏感州医院肿瘤科通讯作者：徐炎华，E-mail：xuyanhua339@126．conl性达100％，特异性达99％。因而IHC与单克隆抗l34临床肺科杂志2014年1月第19卷第1期体相结合的检测方法具有快捷、较高敏感性和特异