RNA干扰TLR4信号通路对枯否细胞吞噬功能的影响-论文.pdf

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1、322主垡塞塑重兰銎查生旦笙!鲞笠塑ne曼xpClinVirol，October2013，Vo1．27，No．5．论著．RNA干扰TLR4信号通路对枯否细胞吞噬功能的影响臧淑妃，刘静，柳银兰，杨文君，罗燕，庄振杰，焦其彬，陈建玉，卞冬雪，马晓洁，苟运浩，朱明利，施军平【摘要】目的探讨RNA干扰Toll样受体4(Toll—likereceptor4，TLR4)信号通路对枯否细胞(Kupfercells，KCs)吞噬功能的影响。方法以RAW264．7小鼠单核巨噬细胞白血病细胞为研究对象，经QPCR验证得到最优干扰RNA为Tlr4

2、一BUS一1567后，以正常细胞为对照组，NegativeControlRNA干扰为NC对照组，TlI4一mus一1567RNA干扰为实验组，倒置显微镜观察各组细胞吞噬酵母菌情况，并测定各组的吞噬细胞百分数和吞噬指数，组问进行比较。结果实验组平均吞噬细胞百分数较正常对照组明显降低(17．67％4-3．51％和32．00％4-3．00％，P<0．01)，实验组平均吞噬指数较正常对照组明显降低(46．33％4-7．51％和82．00％4-6．08％，P<0．O1)。结论RNA干扰TLR4信号通路能降低KCs的吞噬功能。【主题词】

3、枯否细胞；肝疾病；受体，Toll；吞噬作用TheeffectofRNAinterferingTLR4signalpathwayonphagocytosisofKupfercellsZANGShu—fei’，LIUJing，LIUYin—lan，YANGWen~un，LUOYan，ZHUANGZhen-fie，JlA0Qi—bin，CHENJian—yu，BIANDong-xue，MAXiao-jie，XUNrun—hao，ZHUMing—li，SHIJun-ping．ZhejiangUniversityofTradition

4、alChineseMedicine，Hangzhou310053，ChinaCorrespondingauthor：SHIJun-ping，Emaif：davidshiO571@126．con【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheeffectofRNAinterferingTLR4signalpathwayOnphagoeytosisofKupfercells．MethodsRAW2647micemononuclearmacrophageleukemiacellswereobserved．Th

5、etestedgroupwasinterferedbvTlr4一mus一1567RNAwhichhadthebestresultconfirmedbyQPCR，cellsinterferedbyNegativeControlRNAasNCgroup，andnormalcellascontro1．Weperformthephagocytosistestoneachgroup．ResultsThetestedgrouphaslowerphagocytespercentagethancontrol(17．67％4-3．51％VS3

6、2．00％±3．OO％，P<0．01)，andlowerphagocyticindex(46．33％4-7．51％VS82．00％4-6．08％．P<0．01)．ConclusionsDecreasedphagocyticactivitywasobservedonKupffercellsbyRNAinterference．【Keywords】Kupffercells；LiverDiseases；Receptors，Toll；PhagocytosisToll样受体作为一种模式识别受体(pattern．fattyliverdis

7、ease，NAFLD)关系密切的是TLR4。肝recognition，PPR)，能够与病原相关模式分子脏内TLR4主要位于KCs(肝脏固有巨噬细胞)表(pathogenassociatedmolecularpatterns，PAMP)或内面，研究表明KCs表面TLR4激活在单纯性脂肪肝源性配体(如游离脂肪酸)结合后激活细胞内信向非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholicsteatohepatitis，号转导通路，进一步导致炎症的发生。在TLR家族NASH)进展中起着关键作用。巨噬细胞活化后众多成员中，与非酒精性脂肪性肝病(

8、non—alcoholic主要包括吞噬和分泌两大功能，本研究以RAW264．7小鼠单核巨噬细胞白血病细胞为研究对象，检测RNA干扰TLR4信号通路后巨噬细胞的吞噬DOI：10．3760／cma．j．issn．1003-9279．2013．05．002基金项目：国家自然科学基金项目(8107