五价钒致神经细胞凋亡中细胞色素C和caspase-9,3蛋白的变化.pdf

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1、中华劳动卫生职业病杂志2014年9鲞箜!塑』旦zg!!：P!!!!：!：丝：：!·论著·五价钒致神经细胞凋亡中细胞色素C和caspase一9，3蛋白的变化赵捷王静吴精霞【摘要】目的研究五价钒致神经细胞凋亡中细胞色素C(Cyt—c)、caspase一9及caspase一3蛋白的变化，为进一步研究五价钒致神经细胞凋亡的作用机制提供资料。方法用5、l0、20mmol／L的五氧化二钒(v，O)体外培养大鼠神经元细胞染毒，用原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡的程度；蛋白免疫印迹法(Westernblot)检测Cyt—c、Caspase．9、Caspase

2、．3蛋白表达。结果TUNEL检测结果显示，在细胞核中可以见到凋亡小体，随着染毒剂量增高凋亡小体的细胞数逐渐增多。与对照组比较，0、20mmol／L染毒组凋亡指数明显增高，差异有统计学意义(P<0．05或P<0．01oWesternblot法检测结果显示，与对照组比较，5mmol／L染毒组的cyt．c、caspase．3蛋白表达明显升高，差异有统计学意义(P<0．05)；10、20mmol／L染毒组的Cyt_c、caspase．9、caspase．3蛋白表达明显升高，差异有统计学意义(P

3、、caspase一3呈正相关(r=0．954，P

4、erforDiseaseControlAndPreventionofShanxiTaiGangTaiyuan030003，China【Abstract】ObjectiveToinvestigatetherolesofcytochromeC(Cyt-C)，easpase一9，andcaspase一3inpentavalentvanadium．inducedneuronalapoptosisandtoprovideabasisformechanismresearch．MethodsNeuronsfromratsaged1—3dayswereculture

5、dandtreatedwithvanadiumpentoxide(V2O5)at5，10，or20mmol／L．NeuronalapoptosiswasdetectedbyTdT．mediateddUTP．biotinnickendlabeling(TUNEL)．TheproteinlevelsofCyt—C，caspase-9，andcaspase一3weredeterminedbyWesternblot．ResultsApoptosisbodiesweredetectedinthenucleiofneuronsbyTUNEL．Thenumbero

6、fneuronswithapoptosisbodiesincreasedwithincreasingdoseofV2O5Theapoptosisindex(AI)wassignificantlyhigherinthe10and20mm／Lexposuregroupsthaninthecontrolgroup(P<0．05orP<0．01)．WesternblotshowedthattheproteinexpressionlevelsofCyt-Candcaspase-3significantlyincreasedinthe5mmol／Lexposur

7、egroupascomparedwiththecontrolgroup(P<0．05)．Inthe10and20mmol／Lexposuregroups，theproteinexpressionofCyt—e，easpase一9，andcaspase一3allincreasedascomparedwiththecontrolgroup(P<0．01)．NeuronalA1waspositivelycorrelatedwithCyt—C，caspase一9，andcaspase-3(r=0．954，P<0．01；r=O．938，P<0．01；r=0．9

8、43，P