细胞凋亡和Caspase.doc

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1、细胞凋亡和Caspase作者：谢庆祥，林吓聪，韩聪祥　　SignificanceofapoptosisandCaspase3expressioninchronicobstructivekidneys　　ABSTRACT:ObjectiveToinvestigatetherolesandmechanismsofapoptosisanditseffectormoleculeCaspase3inthepathogenesisofchronicobstructivekidney.MethodsCaspase3expressionsin43obstructiverenaltissuesand

2、10normalrenaltissueswereexaminedbyimmunohistochemistry,andapoptosiswasexaminedbyTUNELmethods.TherelationshipsbetweenCaspase3expressionofobstructiverenaltissuesanddegreeofhydronephrosisandrenalfibrosiswereevaluated.ResultsBothCaspase3expressionsandapoptosisindexesintubularandinterstitialcellsof

3、obstructivekidneysweresignificantlyhigherthanthoseinnormalkidneys(P<0.05).Caspase3expressionsinobstructivekidneyswereincloseassociationwithapoptosisandhydronephrosis(P<0.05).Caspase3expressionsininterstitialcellsofobstructivekidneyswerecloselyrelatedtothedegreeofrenalfibrosis(P<0.05).

4、ConclusionIncreasedCaspase3activityplaysanimportantroleinrenalcellapoptosisassociatedwithurinaryobstruction.　　KEYWORDS:kidneytissue;hydronephrosis;apoptosis;Caspase　　摘要：目的探讨细胞凋亡及其效应分子Caspase3在梗阻性肾病中的作用及其机制。方法应用免疫组化方法和原位细胞凋亡检测法分别检测43例梗阻肾组织和10例正常肾组织中Caspase3表达和细胞凋亡指数，并分析梗阻肾Caspase3表达与肾积水程度及肾纤维化程

5、度之间关系。结果梗阻肾的肾小管和间质中细胞凋亡指数和Caspase3表达均显著高于正常肾组织(P<0.05)，而且Caspase3表达与细胞凋亡指数密切正相关(P<0.01)，与肾积水程度也密切正相关(P<0.05)；梗阻肾间质Caspase3表达与肾纤维化程度密切相关(P<0.05)。结论Caspase3活性增强导致细胞凋亡增多在梗阻肾病理生理过程中起着重要作用。　　关键词：肾组织；肾积水；细胞凋亡；Caspase　　　由各种原因引起的尿路梗阻而导致的肾积水是泌尿外科常见病，但对于其肾萎缩、肾纤维化分子病理过程了解甚少。本研究通过检测梗阻性肾组织中细胞凋亡

6、及其主要效应分子Caspase3的表达，探讨两者在梗阻性肾病的病理生理过程中的作用。4　　1材料与方法　　1.1临床资料收集本院1991年1月至2002年12月因梗阻性肾积水行患肾切除43例患者，年龄6-73岁，平均37岁；男27例，女16例。梗阻原因：肾盂输尿管交界处狭窄11例，输尿管末段狭窄3例，输尿管全程炎性狭窄1例，肾结石13例，输尿管上段结石9例，中段2例，下段1例，肾盂癌3例。静脉肾盂造影检查41例：不显影(2h以内)36例，延迟显影5例。根据肾皮质厚度(大部分)将肾积水程度分为两级：皮质厚度≤3mm29例，3-7mm14例。肾盂尿检查30例：pH值7.0-8.1，尿比

7、重均≤1.01。取患肾明显薄软处组织和10例正常肾组织进行石蜡包埋，切片。常规HE染色，病理组织学检查。　　1.2方法①免疫组化：采用SABC方法(微波炉热修复)。Caspase3(1∶40)为兔抗人多克隆抗体，SABC试剂盒为武汉博士德生物公司提供。DAB显色，苏木素复染。PBS替代一抗作为阴性对照。②细胞凋亡检测：采用原位细胞凋亡TUNEL检测法，按说明书进行操作(德国宝灵曼公司提供)。③肾组织中胶原纤维染色：采用VanGieson苦味酸酸性复红染色法行胶原纤维染