P物质刺激脊髓小胶质细胞释放肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-1β的作用观察.pdf

《P物质刺激脊髓小胶质细胞释放肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-1β的作用观察.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、中国药物与临床2014年5月第14卷第5期ChineseRemedies＆Clinics，May2014,Vo1．14，No．5P物质刺激脊髓小胶质细胞释放肿瘤坏死因子一和白细胞介素一1I3的作用观察尹艺儒赵欣张策【摘要】目的探讨P物质对脊髓小胶质细胞的作用。方法利用原代培养的脊髓小胶质细胞，P物质孵育后采用免疫组织化学方法观察细胞形态学改变，采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法观察细胞释放肿瘤坏死因子．c~(TNF．)和白细胞介素．1p(IL．1p)的情况。结果P物质孵育后，小胶质细胞表现出激活态的形态学改变，400Ixmol

2、／L和800~mol／L的P物质孵育6h后，TNF．0【和IL-I~释放增多，12h时达到高峰，之后逐渐下降。结论P物质作为脊髓水平传递痛信号的重要神经递质，可以刺激活化脊髓小胶质细胞，促进小胶质细胞合成释放TNF一0【和IL—lB，并最终促进慢性痛敏的形成。【关键词】P物质；小神经胶质细胞；脊髓；肿瘤坏死因子0【；白细胞介素1SubstancePstimulatesreleaseoftumornecrosisfactor-0【andinterleukin-I13inspinalmicrogliaYinYiru,ZhaoXin,Z

3、hangCe．DepartmentofPhysiology,JointLaboratoryofCellPhysiology,ShanxiMedicalUniversity,Taiyuan03Oo01．China【Abstract】0bjectiveToinvestigatetheefectofsubstancePonthespinalmicrogliaactivation．MethodsPrimaryculturedspinalmicrogliawasincubatedwithsubstanceP．Changesinthemorp

4、hologyofmicrogliawereas—sessedbyimmunohistochemistryassay．Thelevelsoftumornecrosisfactor(rI'NF1．0【andinterleukinfIL)一1Breleasedfrommicrogliaweremeasuredusingenzyme-linkedimmunosorbentassay．ResultsIncubationwithsubstancePwasassociatedwithactivationofspinalmicroglia．Fol

5、lowingincubationof400I~mol／Land800p~mol／LsubstanceP，therewasanincreaseinthelevelsofTNF．andIL广1B。followedbyaculminationat12hoursandareductiontllereafter．ConclusionSubstanceP．acrucialneurotransmitterofpaininthespinalCOrd．canactivatespinalmicrogliaandin—ducethereleaseofT

6、NF．andIL．1Bleadingt0thepathogenesisofchronicpain．【Keywords】SubstanceP．Microglia；Spinalcord；Tumornecrosisfactor-alpha；Interleukin一1脊髓内胶质细胞在慢性疼痛的病理过程中发挥脊髓内P物质的释放，P物质作用于神经元上的重要的作用[。有研究发现外周损伤部位强烈的神经NK1受体，完成痛信号在脊髓的传递和调制。在中传人可以激活脊髓的小胶质细胞和星形胶质细胞[z-。枢神经系统，神经胶质细胞也表达NK1受体。P物人为刺

7、激著传人神经纤维也可以增加脊髓胶质细胞胞质在脊髓内如何影响胶质细胞的功能目前的了解还质内钙离子的浓度。外周应用局部麻醉药阻断伤害比较有限。因此，本研究将对P物质对脊髓小胶质性信息的传人后。也可以抑制脊髓胶质细胞的活化细胞的作用进行研究。和痛觉过敏

8、3]。这些结果提示来自外周初级传人纤1材料和方法维的信号对于脊髓胶质细胞的活化是必需的。1．1原代培养脊髓小胶质细胞：原代培养的脊髓小P物质是脊髓内很重要的传递伤害性信号的神胶质细胞来自出生1d内的Wistar大鼠。将乳鼠断经递质。外周组织受到各种伤害性刺激后都会引起头，用手术刀从背部划

9、开将脊髓取出，置于冰冻的Hank平衡盐溶液(pH6．8—7．O)中。剥去脑脊膜，将DOI：10．11655／zgywylc2014．05．001脊髓切成1mm的小块放人含有5％的DNA酶(1基金项目：国家自然科学基金(81371254)；教育部博士