高糖上调内皮细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1表达的作用机制

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1、万方数据．基础研究．高糖上调内皮细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1表达的作用机制农善伟柯丽琴张小勇黄秀清满永王抒黎健宁应之·219·【摘要】目的探讨高糖上调内皮细胞间黏附分子1(ICAM．1)和血管细胞黏附分子1(VCAM．1)表达的作用机制。方法高浓度葡萄糖(20retool／L)处理分离培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)，以2’-7’．二氯荧光索双醋酸盐(DCFH·DA)标记流式细胞仪检测细胞内活性氧(aos)。Westernblot分析细胞内抑制性蛋白KB(IKB)和核转录因子-KB(NF-KB)蛋白表达和磷酸

2、化水平。免疫荧光法检测NF-KB的活化。结果高糖处理HUVECs后，伴随ROS的显著升高，IKB蛋白明显下调，磷酸化的IKB和NF-KB均增多，使NF．KB移位至细胞核内，导致ICAM．1、VCAM·l的表达明显增强。结论高糖通过刺激ROS的产生和NF-KB的活化上调内皮细胞ICAM-I和VCAM．1黏附因子的表达。【关键词】葡萄糖；内皮细胞；活性氧；细胞黏附分子Mechanismunderlyingup-regulationofICAM-1andVCAM-1expressionsinducedbyhigh#ucosein

3、endothelialcellsNONGShan-wei+，KELi—qin，ZHANGXiao-yong，HUANG尼“一qing，MANYong，WANGShu，LIJian，NINGYing-zhi．’NorthwestNormalUniversity，Lanzhou73DD7D，ChinaCorrespondingauthors：NINGYing-zhi，Email：ningyz@nwnu．edgO'g；12Jian，Entail：lijian@跏moh．饥【Abstract】ObjectiveToinvestig

4、atethemechanismunderlyingup-regulationofICAM·IandVCAM·1expressioninducedbyhiShSluc雠inendothelialcells．MethodsCulturedhumanumbilicalveinendothelialcells(HUVECs)wemtreatedwith20mmol／Lslnco鸵，andcellularreactiveoxygenspecies(ROS)levelwasdetectedbyfloweytometry．Western

5、blotwasappliedtoanalyseexpressionandphosphorylationofIKBandNF-KB．TheactivationofNF-xBWAgmeasuredbyimmunofluoreacence．ResultsTreatmentofHUVECswith20mmol／LSlu嘲edecreasedIKBlevelandstimulatedthephosphorylationofIKBandNF—KB．andaccompaniedbyincreasedROSleveLNF—KBwastra

6、nslocatedintonucleuswhereNF-KBup—reguhtedtheexpressionsofinflammatoryfactorssuchasICAM-IandVCAM-1．CondusionsHighglucoseup—regulatestheexpressionsofICAM一1andVCAM—lviathestimulationofROSgenerationandtheactivationofNF．KBpathway．【Keywords】Glucose；Endothelialcells；Reac

7、tiveoxygenspecies；Celladhesionmolecule糖尿病是心血管疾病的重要危险因素，其中血糖异常是糖尿病患者血管并发症的重要原因之一，高糖导致内皮细胞发生特异的功能异常和形态改DOI：10．3969／j．issn．1007·54lO．20lO．03．016基金项目：国家自然科学基金项目(30440065、30572082、30870273)、北京市自然科学基金资助项目(7052059)作者单位：：730070兰州，西北师范大学(农善伟、宁应之)；卫生部北京医院老年医学研究所(柯丽琴、张小勇、黄秀清

8、、满永、王抒、黎健)通讯作者：黎健，电子信箱：lijian@bjhmokon；宁应之，电子信箱：ningyz@nwnu．edILcn注：农善伟、柯丽琴为并列第一作者；黎健、宁应之为并列通讯作者变，是血管并发症的早期标志。研究表明，高糖具有一定的细胞毒性，可延长内皮细胞的增殖，破坏细胞周期，增加DNA损害