黏附分子αvβ3和αvβ5介导肿瘤细胞与肿瘤内皮细胞的黏附

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1、生堡肚擅苤查!盟!生!旦筮!Q鲞筮!翅堡!垫』Q!!!!：丛型!!鲤!，Y!!：!Q：盟!：!·165·．基础研究．黏附分子仪V133和仪V135介导肿瘤细胞与肿瘤内皮细胞的黏附牛纪晓张文健叶丽亚吴练秋杨治华朱广瑾娄晋宁【摘要】目的体外分析黏附分子avp3和仅vp5及其配体Del一1、L1在肿瘤细胞一内皮细胞黏附中的作用。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT—PcR)和流式细胞分析比较正常肝窦内皮细胞(LsEc)和肝癌的血管内皮细胞r13A上细胞间黏附分子1(IcAM一1)、dvp3和仪ip5的表达以及缺氧对其表达的调控。分别用RT—PcR和westem

2、blot方法分析6种肿瘤细胞DeI一1和L1的表达及缺氧对其表达的调控。使用连续光谱荧光测定仪定量肿瘤细胞在LsEc和BA上的黏附，并分析抗不同黏附分子的抗体和siRNA对肿瘤细胞一内皮细胞黏附的阻断作用。结果1r3A细胞仅vB3和0【vB5的基础表达高于LsEc，而IcAM一1的基础表达低于LsEc。缺氧上调两种内皮细胞dvp3和dvp5的表达，而IcAM一1表达仅在LsEc中升高。在不同肿瘤细胞中，Del一1和L1的基础表达存在明显差异，并且在缺氧条件下受到明显不同的调节。Del—1和L1高表达的肿瘤细胞在”A细胞的黏附明显高于LSEc，并且在缺

3、氧条件下黏附明显增加，这种黏附可以被抗dvp3、仅vp5的抗体或沉默p3和p5的小干扰RNA(siRNA)阻断。结论细胞黏附分子0【vB3、avB5及其配体在肿瘤细胞一肿瘤内皮细胞的黏附过程中起重要介导作用。【主题词】肿瘤细胞；内皮细胞；仪vp3；仪vp5；黏附分子1’llmorceU-tⅢnorendothelialceUa曲esionmedia“沮by删B3锄d唧芦molec山sMU以一戈i∞+，Z黝ⅣG耽n0洫n，阳“一声，形U执n—qi“，yAⅣG铣i—九un，z日UG∞ng手n，LOU^n—ning．+觚￡豇眦o，m站rocirc耐幻凡，m

4、i嬲eAcn如myo厂胁也c甜&如耽即．＆谢州』DDD∞．吼in口co丌邵po蒯i愕n眦^or：三DU以n一凡i愕，E—mo以：肠u．脾，№以com【Abstmct】objectiveToinvestigatetheroleofadhesionmolecules饯vp3anddv茚aJldtlleirligandsDel一1andL1inthetumor．endotIlelialcelladhesioninvitro．Metllods‘rheexpressionofdvB3，仪vB5andICAM．1inliversinusoidalendot}le

5、lialcells(LSEC)andlivercancerendothelialcells(7I．3A)culturedundernomoxiaorhvpoxiawereanalvzedbvRT—PCRandnuorescentactivatedcellsorter(FACS)．TheexpressionofDel．1andL1insixtumorcelllinesundernonnoxiaorhvpoxiawereanalvzedbvRT．PCRandWestemblot，respectivelv．Theadhesionofdye．1abeledt

6、umorcellsandendothelialLSECandr乃Acellswasmeasuredbyanuorescenceplatereaderaftertheirculture．R鹤IlltsTheexpressionof仅vB3and仪v85werehi出erinBAcellsthanthatinLSECceUs，andweIeupregl_llatedunderhypoxia，whiletheexpre8sionofICAM一1waslowerin713Acell8thanthatinLSECcells，andwasupregulatedu

7、nderhypoxiaonlvinLSEC．TheexpressionofDel．1andL1moleculeswereobviouslydifferentinvarioustumorcelllinesandweredifferentiaUyreP：ulatedunderhypoxia．TheadhesionoftumorceUswithDel—1orL1expressionwashigherinT3AcellsthanthatinLSECcells，andwassignificantlyincreasedunderhypoxiacondition．

8、Furthemlore，theadhesionoftumorcellsto乃Acouldbeinhibite