《诊断学》 第五节 纤溶活性检测

《诊断学》 第五节 纤溶活性检测

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1、第五节纤溶活性检测纤维蛋白溶酶(纤溶酶)可将已形成的血凝块加以溶解,产生纤维蛋白(原)的降解产物,从而反映纤溶活性。纤溶活性增强可致出血,纤溶活性减低可致血栓。一、筛检试验(一)优球蛋白溶解时间【原理】血浆优球蛋白(euglobulin)组分中含有纤维蛋白原(Fg)、纤溶酶原(PLG)和组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)等,但不含纤溶酶抑制物(plasmininhibitor)。受检血浆置于醋酸溶液中,使优球蛋白沉淀,经离心除去纤溶抑制物,将沉淀的优球蛋白溶于缓冲液中,再加入适量钙溶液(加钙法)或凝血酶(加酶

2、法),使Fg转变为纤维蛋白凝块,观察凝块完全溶解所需时间。【参考值】加钙法:(129.8±41.1)min;加酶法:(157.0±59.1)min。一般认为<70rain为异常。【临床意义】本试验敏感性低,特异性高。1.纤维蛋白凝块在70min内完全溶解表明纤溶活性增强,见于原发性和继发性纤溶亢进,后者常见手术、应激状态、创伤、休克、变态反应、前置胎盘、胎盘早期剥离、羊1水栓塞、恶性肿瘤广泛转移、急性白血病、晚期肝硬化、DIC和应用溶血栓药(rt-PA、UK)。2.纤维蛋白凝块在超过120min还不溶解表明

3、纤溶活性减低,见于血栓前状态、栓性疾病和应用抗纤溶药等。(二)D-二聚体定性试验【原理】D-二聚体(D-dirner,D-D)是交联纤维蛋白降解产物之一,为继发性纤溶特有的代谢物。抗D-D单克隆抗体包被于胶乳颗粒上,受体血浆中如果存在D-二聚体,将产生抗原-抗体反应,胶乳颗粒发生聚集现象。【参考值】胶乳颗粒比阴性对照明显粗大者为阳性,正常人为阴性。【临床意义】D-D阴性是排除深静脉血栓(DVT)和肺血栓栓塞(PE)的重要试验,阳性也是诊断DIC和观察溶血栓治疗的有用试验。凡有血块形成的出血,本试验均可阳性,

4、故其特异性低,敏感度高;但在陈旧性血块时,本试验又呈阴性。(三)血浆纤维蛋白(原)降解产物定性试验【原理】于受检血浆中加入血浆纤维蛋白(原)降解产物[fibrin(agen)degradationproduct,FDPs]抗体包被的胶乳颗粒悬液,若血液中FDPs浓度超过或等于5μg/ml,胶乳颗粒发生凝集。2根据受检血浆的稀释度可以计算出血浆FDPs含量。【参考值】胶乳凝集法:阴性。【临床意义】FDPs阳性或增高见于原发性纤溶(primaryfibrinolysis)和继发性纤溶(sencondaryfib

5、rinolysis),后者如DIC、恶性肿瘤、急性早幼粒细胞白血病、肺血栓栓塞、深静脉血栓形成、肾脏疾病、肝脏疾病、器官移植的排斥反应、溶血栓治疗等。二、诊断试验(一)血浆组织型纤溶酶原激活剂测定【原理】血浆优球蛋白含有吸附于纤维蛋白上的组织型纤溶酶原激活剂(tissue-typeplasminogenactiVator,t-PA),它使PLG转变为纤溶酶(PL),PL可使发色底物(S-2251)释出对硝基苯胺(PNA)而显色,显色的深浅与受检血浆中t-PA含量呈正相关。所测得的A值,可从标准曲线计算受检血

6、浆中t-PA:A含量。【参考值】发色底物法:0.3~0.6活化单位/ml.【临床意义】1.增高表明纤溶活性亢进,见于原发性纤溶和继发性纤溶(如DIC)等。32.减低表明纤溶活性减弱,见于血栓前状态和血栓性疾病,如动脉血栓形成、深静脉血栓形成、高脂血症、口服避孕药、缺血性脑卒中和糖尿病等。(二)血浆纤溶酶原活性测定【原理】受检血浆中加链激酶(SK)和发色底物(S-2251),受检血浆中的血浆纤溶酶原活性(plasminogen,PLG)在SK的作用下,转变成纤溶酶(PL),后者作用于发色底物,释出对硝基苯胺(

7、PNA)而显色。显色的深浅与纤溶酶的水平呈正相关,通过计算求得血浆中PLG:A的含量。【参考值】发色底物法:75%~140%。【临床意义】1.PLG:A增高表示纤溶活性减低,见于血栓前状态和血栓性疾病。2.PLG:A减低表示纤溶活性增高,见于原发性纤溶、继发性纤溶和先天性PLG缺乏症。(三)血浆纤溶酶原激活抑制物-1活性测定【原理】受检血浆中加入纤溶酶原激活剂(PA)和PLG,血浆中的PAI-1与PA形成复合物,剩余的PA使PLG转变成PL,PL作用于发色底物,释出PNA而显色,其颜色的深浅与PL的活性呈4

8、正相关;而血浆中PL与纤溶酶原激活抑制物-1活性(plasmino-genactiVatorinhibitor-l,PAI-1)呈负相关,从所测得的A值,可计算出血浆中PAI-1:A的水平。【参考值】发色底物法:0.1~1.0抑制单位/ml。【临床意义】1.PAI-1增高表示纤溶活性减低,见于血栓前状态和血栓性疾病。2.PAI-1减低表示纤溶活性增高,见于原发性和继发性纤溶。(四)血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验(pl

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