亚麻木质素合成相关基因COMTRNAi表达载体构建及转化-论文.pdf

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1、2014年第36卷第4期中国麻业科学PLANTFIBERSCIENCESINCHINA169文章编号：1671—3532(2014)04—0169—06亚麻木质素合成相关基因COMTRNAi表达载体构建及转化龙松华，乔瑞清。，李翔，陈信波I_，邓欣，邱财生，郭媛，郝冬梅，王玉富”(1．中国农业科学院麻类研究所，湖南长沙，4102052．湖南农业大学作物基因工程湖南省重点实验室，湖南长沙，4101283．湖南环境生物职业技术学院，湖南衡阳，421005)摘要：以已经克隆到亚麻木质素合成关键酶咖啡酸一O一甲基转移酶基因(COMT)全长cDNA序列为基础，通过

2、扩增RNAi顺式及反式片段(均为249bp)，先连接到中间载体pBSK，再连接表达栽体pCAMBIA一1301一multi，构建成COMT基因的RNAi表达载体，通过农杆菌介导转化亚麻，获得转基因植株，通过GUS染色和PCR检测，表明干扰载体已经转入亚麻中。这为推进亚麻纤维品质改良的分子育种提供了基础。关键词：亚麻；COMT基因；RNAi；载体构建；遗传转化中图分类号：$563．2文献标志码：AConstructionofRNAiVectorCaffeicAcidO．．methyltransferaseGeneandTransformationinFla

3、xLONGSong—Hua，QIAORui—Qing，LIXiang3，CHENXin—Be，DENGXin，QIUCai—Sheng，GUOYuan，HAODong—Mei，WANGYu—Fu’。(1．InstituteofBastFiberCrops，ChineseAcademyofAgriculturalSciences，Changsha，Hunan410205，China；2．HunanAgriculturalUniversity，KeyLaboratoryofCropGeneEngineeringofHunanProvince，Changsha

4、410128，China3．HunanPolytechnicEnvironmentandBiology，HengyangHunan421005，China)Abstract：CaffeicacidO—methyltransferase(COMT)isanenzymerelatedwithligninbiosynthe—sis．Basedonitsfu11一lengthcDNAclonedinvector．beththepositive—senses~andandantisensestrandofCOMTwith249bpwereamplifiedbyPC

5、1LTheRNAiplantexpressionvectorwasconstructedharboringbeththepositive—sensestrandandantisensestrandofC0MT．whichwasnamedRNAi—COMTandthenintroducedintowild～typeflaxvarietybyagrobacterium—mediatedmethod．Trans．formedplantswererandomlyselectedanddetectedbyGUSandPCR．Theresultsshowedthat

6、theRNAistructureharboringtheCOMTgenehadbeenintegratedintoflaxgenome．isSUCCESSwillprovideaba—sisforflaxmoleeularbreedingtoimprovefiberquality．收稿日期：2014—06—17基金项目：国家自然科学基金项目(31000745)、国家麻类产业技术体系(CARS一19一El4)作者简介：龙松华(1979一)，助理研究员，主要从事亚麻栽培及分子生物学研究。E—mail：longsonghua79452@163．corll通讯作

7、者：王玉富(1962一)，研究员，主要从事亚麻育种和栽培研究，E—mail：chinaflax@126．corn。170中国麻业科学第36卷Keywords：flax；COMTgene；RNAi；veetorconstruction；transformation亚麻LinumusitatissimumL)是世界上最古老的纤维作物之一，素有“纤维皇后”之美誉，埃及各地的木乃伊就是由亚麻布包裹的。人类栽培和利用亚麻的历史可以追溯到8000多年前【1]。亚麻也是世界上分布最广的麻类作物，横跨东西半球，北至加拿大的魁北克，南至澳大利亚均有亚麻生长。全世界有20多

8、个国家和地区种植纤维亚麻。亚麻纤维的吸湿散湿能力比棉高18％，亚麻纺织品以其吸湿