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1、信阳师范学院学报:自然科学版JournalofXinyangNormalUniversity第26卷第4期2013年10月NaturalScienceEditionVo1.26No.40ct.2013DOI:10.3969/j.issn.1003-0972.2013.04.014培养方法及胎牛血清浓度对人胎儿成纤维细胞体外生长的影响程腾,李佳佳,贺小英,刘娟,马利兵(内蒙古科技大学数理与生物工程学院,内蒙古包头014010)摘要:采用单细胞培养法和组织块培养法从原代培养人胎儿成纤维细胞,并在不同体积分数胎牛血清(FBS)(0%、4%、8%、10%、12%
2、)的奈件下观察人胎儿成纤维细胞培养的状况并采用台盼蓝染色法进行活细胞计数.结果表明,早期由组织块培养法原代培养获取的细胞形态要比单细胞培养法原代培养获取的细胞稍好些,且在细胞传代后极少出现无法贴壁的死细胞.FBS对hFFs生长影响比较明显.在实际应用中,在体积分数8%FBS下,采用组织块培养法进行人胎儿成纤维细胞体外培养,效果良好.关键词:人胎儿成纤维细胞;单细胞培养法;组织块培养法;胎牛血清中图分类号:$828文献标志码:A文章编号:1003-0972(2013)04-0523-04TheEffectofCultureMethodandConcentr
3、ationofFetalBovineSerumontheGrowthofHumanFetalFibroblastsCulturedinVitroChengTeng,LiJiajia,HeXiaoying,LiuJuan,MaLibing(SchoolofMathematics,PhysicsandBiologicalEngineering,InnerMongoliaUniversityofScience&Technology,Baotou014010,China)Abstract:Theeffectofsinglecellculturemethodand
4、tissueblockculturemethodonthegrowthofhumanfetalfi—broblastsculturedinvitrowascompared,andthebesteffectofwhichconcentrationofFBSonthegrowthofhumanfetalfibroblastculturedinvitrowasstudied.Humanfetalfibroblastswereprimarilyculturedbysinglecellculturemethodandtissueblockculturemethod
5、,andtheconditionofhumanfetalfibroblastsonbovineserum(FBS)(0%,4%,8%,10%,12%)wasobserved.Thenbymeansofthemethodoftrypanbluestaining,theviablecellswerecounted.Theresuhsshowedthat,intheprimarypassage,themorphologyofcellbytissueblockculturemethodisbetterthanthatofcellculturedbysinglec
6、ellmethod,anddeadcellsofunabletostickwallwereseldomappearedafterpassage.FBShadsignificantinfluenceonthegrowthofhFFs.Intherealapplication,whentheconcentrationofFBSwas8%,usingtis—sueblockculturemethodtocultivatehumanfetalfibroblastshadagoodeffect.Keywords:humanfetalfibroblasts;sing
7、lecellculturemethod;tissuemasscuhuremethod;fetalbovineserum人组织来源的细胞取材不易、较难体外培养且往往0引言生长速度较慢;而胎儿组织来源的细胞则可从流产近年来关于诱导性多潜能干细胞(induced的胎儿取材,同时因胎儿组织有极强的生长潜力,pluripotentstemcells,iPSCs)的研究是生物技术领由其来源的细胞往往易于培养且生长速度很快.其域的热点之一,尤其是人的诱导性多潜能干细胞的中人胎儿成纤维细胞(humanfetusfibroblast,研究更是众人所关注的,所以实验中人类的
8、细胞需hFFs,也称为人胚胎成纤维细胞,humanembryofi—求大大增加,
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