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1、·236·中国实验血液学杂志JournalofExperimentalHematology2002;10(3):236-239人脐血清代替胎牛血清培养树突状细胞1王立茹,史 斌,崔建英,韩淑霞,王申五,陈金莉1(首都医科大学附属复兴医院血液科,北京100038;北京大学人民医院血液病研究所,北京100044)摘要 为探讨脐血清(umbilicalcordserum,UCS)取代胎牛血清(fetalcalfserum,FCS)对体外培养体系中树突状细胞分化和功能的影响,用脐血清代替FCS培养树突状细胞,通过流式细胞术检测细
2、胞表型和MTT法检测混合淋巴细胞反应的能力。结果表明,脐血清培养的DC(UCS2DC)表面CD83,CD86和HLA2DR的表达率明显高于FCS组DC;而CD1a表达率低于FCS2DC;对混合淋巴细胞反应的刺激能力UCS2DC与FCS2DC均较对照组明显增强,但UCS2DC与FCS2DC间无明显差别。结论:脐血清代替FCS可以产生完全不含异种蛋白、表型比含FCS体系培养的DC更成熟,且有较强的刺激同种异体T淋巴细胞增殖能力的DC。关键词 树突状细胞;脐血;脐血清;胎牛血清中图分类号 R33111DendriticCel
3、lsCulturedwithHumanUmbilicalCordSeruminSteadofFetalCalfSerum1WANGLi2Ru,SHIBin,CUIJian2Ying,HANShu2Xia,WANGShen2Wu,CHENJin2Li(DepartmentofHematology,FuXingHospital,CapitalUniversityofMedicalSciences,Beijing100038;1InstituteofHematology,People′sHospital,PekingUniver
4、sity,Beijing100044)AbstractToinvestigatewhetherthedendriticcells(DC)couldgrowupinculturalsystemwithumbilicalcordserum(UCS),theUCSwasusedinthecultureinsteadoffetalcalfserum.ThephenotypeofdendriticcellswasdetectedbyflowcytometryandtheantigenpresentingabilityofDCinal
5、lo2MLRwasmeasuredbyMTTassay.TheresultsshowedthatDCgrowninUCS(UCS2DC)hadhigherexpressionrateofCD86,CD83andHLA2DRthanthatingrowninFCS(FCS2DC).(P<0.05),andtheirexpressionofCD1awaslowerthanthatofFCS2DC.TheabilitytoinduceTcellproliferationhadnodifferencebetweenUCS2DCan
6、dFCS2DC.ItissuggestedthatdendriticcellswithmorematurephenotypehadbeenproducedinthemediumcontainingUCSthanthoseinthemediumcontainingFCS,andUCS2DCpossessedpotentabilitytostimulateproliferationofallogeneicTcells.Keywordsdendriticcell;umbilicalcordblood;umbilicalcords
7、erum;fetalcalfserum 树突状细胞(dendriticcell,DC)是功能最强的材料与方法[1]抗原呈递细胞。它通过表面丰富的免疫分子,不仅可以聚集免疫细胞,更有利于免疫细胞间信息传研究对象递;它还分泌多种细胞因子,诱导高效的特异性免疫正常人外周血3份,由北京市血站提供。[2]反应。而肿瘤患者免疫功能低下的原因之一是实验材料抗原呈递细胞数量不足或功能低下,肿瘤的清除依细胞因子:rhGM2CSF购自邦定生物医学公司。靠充足的宿主抗原呈递细胞功能,因此DC可能在rhIL24和rhTNF2α购自美国Pepro
8、2Tech公司。单治疗肿瘤、预防肿瘤发生、复发及转移中发挥重要作克隆抗体均购自美国PharMingen公司,包括:PE标[3]用。目前人们尝试用各种方法培养DC,以制备记的鼠抗人CD86,HLA2DR和CD4;FITC标记的治疗肿瘤的DC疫苗。传统的DC培养体系多采用鼠抗人CD1a,CD83和CD8;F