多重引物PCR测序方法分析河北青县乙肝HBsAg阳性者的S基因特点-论文.pdf

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1、276中国药事2014年第28卷第3期·工作研究·多重引物PCR测序方法分析河北青县乙肝HBsAg阳性者的S基因特，占l'、辜文洁，黄维金，王兴烨，吴星，周诚，王丽艳，梁争论(中国食品药品检定研究院，北京100050；河北省沧州市青县人民医院)摘要：目的分析河北青县地区乙肝HBsAg阳性者的s基因特点。方法乙肝血清标志物酶联免疫检测试卉】检测乙肝五项血清标志物，乙肝荧光PCR核酸定量试剂检测HBV病毒栽量，利用多重PCR的方法，扩增乙肝S基因，序列分析其基因型、血清型特点，并分析不同标志物组合中乙肝病毒载量变化。结果在101份乙肝HBsAg阳

2、性者中，主要有4种血清学模式：A(HBsAg+，HBeAg一，HBeAb一，HBcAb+)、B(HBsAg+，HBeAg一，HBeAb+，HBcAb+)、C(HBsAg十，HBeAg+，HBeAb一，HBcAb4-)和D(HBsAg+，HBeAg+，HBeAb一，HBcAb一)，比例分别为15．8(16／101)、5O．5(51／101)、28．7(29／101)和5．0(5／101)。荧光定量PCR法HBV核酸阳性率为86(87／101)，多重PCR方法的核酸阳性率为94(95／101)，两者无显著统计学意义(y一3．55，P>0．05)。

3、A、B、C和D血清学模式的病毒载量分别为：1．6X10、8．5×1O。、1．8×1O和1．5×10IU·mL。该地区以C基因型为主占91(86／95)，B基因型仅9(9／95)；血清型以adr为主占80(76／95)，adw血清型19(18／95)，ay血清型1(1／95)。不同血清学模式下乙肝的基因型和血清型分布没有显著差异，血清模式e抗原阳性人群的病毒栽量显著高于e抗原阴性人群，e抗原阳性人群的年龄低于e抗原阴性人群(P<0．01)。结论多重PCR方法与荧光定量PCR方法的灵敏度相当，可以用于乙肝的S基因序列分析，青县地区C基因型乙肝病毒

4、占绝对优势，应引起重视。关键词：乙型肝炎病毒；病毒载量；基因型；血清型；聚合酶链式反应中图分类号：R392．1文献标识码：A文章编号：1002—7777(2014)030276—06SGeneCharacteristicsinHBsAgPositivePeopleinQingxianCountyofHebeiProvincewithMultiplePrimerPCRSequencingMethodGuWenjie，HuangWeijin，WangXingye，WuXing，ZhouCheng，WangIiyanandLiangZhenglun

5、(NationalInstitutesforFoodandDrugControl，Beijing100050；QingxianCountyPeopleSHospitalofCangzhouCity)ABSTRACT：ObjectiveToanalyzetheSgenecharacteristicsofHBsAgpositivepeopleinQingxianCountyofHebeiProvince．MethodsHepatitisBvirus(HBV)relatedserologicalmarkersweredetectedwithcorr

6、espondingELISAkits．TheDNAlevelsofHBVweredetectedwithHBVfluorescentquantitativePCRreagent．SgenesofHBVwereamplifiedwithmultiplexprimerPCR．GenotypesandserotypesofHBVwereidentifiedthroughsequenceanalysis，andtherelationshipbetweenHBVserologicalmarkerpatternsandHBVDNAlevelswasana

7、lyzed．ResultsIn101HBVinfectedpersons，基金项目：国家“十二五”艾滋病和病毒性肝炎等重火传染病防治科技重大专项(编号2o12ZX10004701)作者简介；辜文洁，副主任技师并列第一作者：黄维金，副研究员通讯作者：粱争论，研究员，从事肝炎疫苗和诊断试剂研究；Tel：(010)67095357；E—mail：lzhenglun@126．com中国药事2014年第28卷第3期277thereweremainly4serologicalpatterns：A(HBsAg+，HBeAg-，HBeAb一，HBcAb+)，

8、B(HBsAg+，HBeAgL，HBeAb4-，HBcAb4-)，C(HBsAg+，HBeAg+，HBeAb一，HBcAb+)andD(HBsAg+，HBeAg4-