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1、第21卷第4期无锡轻工大学学报Vol.21No.42002年7月JournalofWuxiUniversityofLightIndustryJul.2002文章编号:1009-038X(2002)04-0379-05多重PCR方法检测食品中转基因成分1,211212刘光明, 苏文金, 梁基选, 高榕, 宋思扬, 陈伟铃(1.厦门大学生命科学学院,福建厦门361005;2.厦门出入境检验检疫局,福建厦门361012)摘 要:根据转基因农作物中最常用的花椰菜花叶病毒启动子(CaMV35S)和根癌农杆菌终止子(
2、NOS)的序列,设计合成了两对不同的引物和相对应的两种荧光双链探针(FDCP),分别建立了多重PCR、应用FDCP的实时荧光PCR同时检测转基因成分35S启动子和NOS终止子的方法.并利用该套方法对马铃薯、大豆、玉米、甜椒、番茄等实物样品进行了检测,发现13份样品中有6份检出35S启动子、NOS终止子,其余7份样品的检测结果为阴性.表明作者建立的多重PCR方法能有效检测出35S和NOS成分,其中多重PCR法具有灵敏度高、特异性好的特点,多重荧光PCR法则更为简便、快速、准确.关键词:转基因食品;多重PCR
3、;荧光PCR;荧光双链探针中图分类号:Q789文献标识码:AMultiplexPCRforDetectingTransgenicComponentinFoods1,2112LIUGuang2ming,SUWen2jin,LIANGJi2xuan,GAORong,12SONGSi2yang,CHENWei2ling(1.SchoolofLifeScience,XiamenUniversity,Xiamen361005,China;2.XiamenEntry2ExitInspectionandQuaranti
4、neBureau,Xiamen361012,China)Abstract:ThearticleistoestablishaPCRmethodfordetectingtransgeniccomponent35SpromoterderivedfromCauliflowerMosaicVirusandNOSterminatorderivedfromAgrobacteriumtumefacienssimultaneously.Accordingtothespecificsequenceof35SandNOSwhi
5、chhavebeenusedintransgeniccropsfrequently,twopairsofprimersandtwopairsofcorrespondingfluorophoredouble2chainprobes(FDCP)weredesignedandsynthesized.PCR&FluorescencePCR(FPCR)methodswereestablishedforgeneralscreeningoftransgeniccomponent35SandNOSsimultaneous
6、lywithMultiplexPCRinatube.13samplesweretestedwithPCR&FPCR.Theresultsshowedthat6sampleswerepositive,7sampleswerenegative.Themethodsgaveasensitive,specific,simpleandaccuratedetectionoftrans2geniccomponent,andthusprovidedausefultoolforroutineanalysisofrawand
7、processedfoodprod2ucts.Keywords:geneticallymodifiedfood;multiplexPCR;fluorescencePCR;fluorophoredouble2chainprobe收稿日期:2002-02-22;修订日期:2002-04-20. 基金项目:厦门市科技计划项目(3502Z2001109)资助课题.作者简介:刘光明(1972-),男,湖南株洲人,分子生态学博士研究生,工程师. 无 锡 轻 工 大 学 学 报
8、 380第21卷 目前转基因食品大多来源于转基因农作物.据NOS荧光探针为FAM25′2GCATGACGTTAT全球农业生物技术应用咨询署提供的统计资料显TTATGAGATGGGT23′及5′2TCATAAATA示,2001年美国、阿根廷、加拿大等国家开始商业化ACGTCATGC23′2DABCYL.由上海生工生物工程[1]种植转基因作物.转基因技术给人们带来了巨大技术服务有限公司合成.的社会经济效益的同时,相关产品
