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1、※分析检测食品科学2012,Vol.33,No.12159多重PCR检测转基因水稻的转基因成分魏霜1，陈贞1，芦春斌2，马骏3，白卫滨1，吴希阳1,*(1.暨南大学理工学院食品科学与工程系，广东广州510632；2.暨南大学生殖免疫研究所，广东广州510632；3.广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心，广东广州510623)摘要：以水稻内源基因SPS、外源抗虫基因Cry1Ab、外源抗虫基因Cry1Ab/Ac、外源抗虫基因Btc、报告基因GUS、NOS终止子和CaMV35S启动子为检测对象，设计7对引物，通过优化PCR扩增体系
2、中不同引物浓度的配比及退火温度，建立水稻转基因成分的七重PCR检测体系。结果表明：建立的七重PCR体系能有效检测出水稻及其他作物(大豆、玉米、棉花籽、菜籽粕)中的转基因成分，检测过程简便、特异性好。关键词：转基因检测；水稻；七重PCRMultiplexPCRDetectionofTransgenicComponentsofGeneticallyModifiedRiceWEIShuang1，CHENZhen1，LUChun-bin2，MAJun3，BAIWei-bin1，WUXi-yang1,*(1.DepartmentofF
3、oodScienceandEngineering,CollegeofScienceandEngineering,JinanUniversity,Guangzhou510632,China；2.InstituteofReproductiveImmunology,JinanUniversity,Guangzhou510632,China；3.InspectionandQuarantineTechnologyCenter,GuangdongEntry-ExitInspectionandQuarantineBureau,Guangz
4、hou510623,China)Abstract：Inordertodetecttransgeniccomponentsingeneticallymodifiedrice,endogenousgeneSPS,exogenousinsectresistantgeneCry1Ab/Ac,exogenousinsectresistantgeneCry1Ab,exogenousinsectresistantgeneBtc,reportergeneGUS,NOSterminatorandCaMV35Spromoterwereevalu
5、atedbymultiplexpolymerasechainreaction.Sevenpairsofprimersweredesigned,andprimerconcentrationandannealingtemperaturewereoptimizedtoestablishamultiplexPCRsystem.Theresultsshowedthatthedevelopedseven-plexPCRsystemcouldallowthedetectionoftransgeniccomponentsingenetica
6、llymodifiedriceandothercropsincludingsoybean,corn,cottonseedsandrapeseedmealwithhighefficiencyandgoodstability.Keywords：transgenicdetection；rice；seven-plexPCR中图分类号：TS207.7文献标识码：A文章编号：1002-6630(2012)12-0159-04水稻是占全世界50%人口的主粮，自第1批水稻转包括常规PCR、巢式和半巢式PCR、RT-PCR(reverse基因
7、植株在1988年问世以来，许多国家在水稻转基因研transcriptionPCR)、PCR-ELISA技术等。Dietrich等[4]针究中取得一系列成果，许多转基因水稻育种材料已经进对转基因水稻中的转基因成分，利用实时荧光定量PCR入田间试验，并不断向实用化方向发展。随着转基因产法进行了检测，检测灵敏度为0.1%。陈茹等[5]利用PCR-业的发展，转基因食品的安全性问题受到广泛关注，日ELISA技术建立了检测转基因水稻的体系，比常规电泳本、欧盟等许多国家相继建立了转基因食品标识制度[1]。检测可提高敏感性达1000倍。这些
8、方法虽然对结果有更我国也于2002年3月20日起要求对5类转基因生物所涉加准确的把握，但是操作过程复杂，检测成本较高，及的17种转基因产品进行标识[2]。对操作人员要求较高。目前对转基因植物产品的检测方法主要分为两类：多重PCR是指在一次PCR反应中同时加入多对引第1类以导入外源基因的特定
