CSFV和PRRSV多重RT—PCR检测方法的建立-论文.pdf

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1、第36卷第1期中国预防兽医学报Vo1．36．NO．12014年1月ChineseJournalofPreventiveVeterinaryMedicineJan．20l4doi：10．3969~．issn．1008-0589．2014．01．09CSFV和PRRSV多重RT—PCR检测方法的建立曲哲会，郭晓秋，刘涛(信阳农林学院动物科学系，河南信阳464000)摘要：为建立同时检测猪瘟病毒(CSFV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)经典株和高致病性株fHP．PRRSV1的多重RT．PCR检测方法，本研究根据GenBank中登录的PRRSV经典株、HP—PRRSV株和CSFV基因

2、组全序列，分别设计了2对特异性引物PRRSV．S／PRRSV．A和CSFV．S／CSFV-A，产物分别为544bp、457bp和294bp检测结果显示，该方法具有高特异性，均可检测到1TCID50的病毒量。对65份临床上疑似为CSFV和PRRSV感染的病料样品进行检测的结果表明，本研究建立的多重RT．PCR检测方法可以用于临床上CSFV和PRRSV感染引起的传染病病原学的检测，并且能够准确鉴别PRRSV经典株及HP-PRRSV。关键词：猪瘟；猪繁殖与呼吸综合征；多重RT—PCR中图分类号：$852．65文献标识码：A文章编号：1008—0589(2014)01-0034·04Thed

3、evelopmentofmultiplexRT—PCRfordetectionsofCSFVandPRRS；VQUZhe—hui，GUOXiao-qiu，LIUTao(DepartmentofAnimalScience，XinyangCollegeofAgriculturalandForestry，Xinyang464000，China)Abstract：Toestablishtheassayfordetectionsofclassicalswinefevervirus(CSFV)andporcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus(PR

4、RSV)，aswellasdistinguishingtheconventionalPRRSVandthehighlypathogenicPRRSV(HP—pmp,sv)，themultiplexRT-PCRwasdevelopedwithtwopairspecificprimersofPRRSV-S／PRRSV·-AandCSFV-S／CSFV-AdesignedforHP-PRRSV，conventionalPRRSVandCSFVbasedonthesequencesinGenBank．TheresultsshowedthattheassaywasabletodetectCSF

5、V，HP-PRRSVandconventionalPRRSVsimultaneouslybyamplifyingDNAfragmentsof294bp，457bpand547bp，respectively，andthesensitivityoftheassaywasupto1TCID50foreachvirus．Moreover，atotalof65clinicalsamplestestedbythemultiplexRT—PCR，andtheresultsweresimilartothedetectionsbycommercialdetectionkitswhichthecoinc

6、idenceratewas96．92％．Therefore，themultiplexRT—PCRassaycouldbeusedfordetectionofCSFVorPRRSVininfectedpigs．Keywords：classicalswinefever；porcinereproductiveandrespirationsyndrome；multiplexRT—PCR猪瘟(Classicalswinefever，CSF)是由CSF病毒syndrome，PRRS)是由PRRS病毒(PRRSV)引起主要(CSFV)~I起的一种急性、高度接触性传染病，以稽以母猪出现繁殖障碍和仔猪

7、呼吸障碍为主要特征的留高热、出血和高死亡率为主要特征_l_。猪繁殖与传染病[2J。二者均为目前规模化养殖场的多发病，呼吸综合征(Porcinereproductiveandrespiration并且极易继发其他病原感染，加剧病症，死亡率升*Correspondingauthor收稿日期：2013．04．04基金项目：信阳农业高等专科学校青年教师科研基金项目(2009ZRKX016)作者简介：曲哲会(1980．)，男，黑龙江鸡西人，讲师，主要从事动物传染病学