体外加压灌注对新西兰白兔慢性后肢动脉闭塞疾病侧支循环建立的影响-论文.pdf

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1、中国药物与临床2014年6月第l4巷第6期ChineseRemedies&Clinics，June2014,Vo1．14，No．6·755·体外加压灌注对新西兰白兔慢性后肢动脉闭塞疾病侧支循环建立的影响张超胡杰闰盛刘新奇辛振磊董红霖本实验拟运用新西兰白兔慢性后肢动脉闭塞疾病模型，防止出血可双重结扎)。结扎完毕后，压力泵加压，使压力控探索体外加压灌注治疗．并检测对侧支血管生成密切相关的制在100～200kPa(即1—2bar，兔平均动脉压114mmHg，舒血管内皮生长因子(VEGF)因子表达的影响。张压93．65mmHg，收缩压134mmHg，据国际单位换算，当压1材料和方法力泵维持于低限100

2、kPa时，约为兔血压的6．09倍)，待101．1实验动物分组：新西兰白兔(体质量2-2．5kg)雌雄不ml兔血全部加压灌注入下肢后，再重复以上操作。共计给予限，共16只(山西医科大学动物中心供应并饲养)，随机分为加压灌注24h。2组：①健康对照组8只(I组)；②实验组8只(Ⅱ组)。1．4下肢肌肉组织病理取材：2组动物于操作结束后，3％戊1．2植入缩窄器：2组兔均给予植入手术，经兔耳缘静脉注巴比妥深麻醉．取白兔右后肢内收肌肌肉。经4％多聚甲醛缓射3％戊巴比妥钠30rag／ks麻醉后，固定于手术台，充分暴冲液固定24h后，行水平位切片。行免疫组织化学处理，观露右侧腹股沟。以8％硫化钠脱手术区兔毛，

3、术野消毒，腹察VEGF的表达。2组标本取材部位一致，分别送病理科检股沟纵型切口．于股浅动脉开n下2cm处置入缩窄器(自制测。吸水膨胀橡胶环，因缩窄器中橡胶吸水膨胀，股浅动脉将逐1．5统计分析：采用SPSS10．0软件处理分析．各参数以渐狭窄直至闭塞)。检查术野无活动性出血后，逐层关闭切表示，两样本问计数资料采用两独立样本的￡检验，当P<口。术后4d内。每12h肌肉注射头孢唑林钠0．5g1次，预0．05差异具有统计学意义。防感染。待14d后，血管已完全闭塞。遂进行体外加压灌注装2结果置植入术。14d后，切开植入缩窄器处皮肤，充分暴露，肉眼观察，1．3植人体外加压灌注装置：仪实验组(Ⅱ组)植入，在

4、经兔缩窄器内橡胶已完全膨胀中间孔洞消失，右侧股浅动脉完全耳缘静脉注射3％戊巴比妥钠30mg／kg麻醉后，固定于手术闭塞，造模成功。给予体外加压灌注，24h后，处死2组新西台，充分暴露颈部及右侧腹股沟。以8％硫化钠脱尽手术区兰白兔，取右后肢组织行病理切片．免疫组织化学标记VEGF兔毛，术野消毒．取颈部正中切口，于甲状软骨上缘水平分离因子。经光镜观察，实验组新西兰白兔血管VEGF的表达量右侧颈总动脉约1．0—2．0em，以穿刺针穿刺颈总动脉，穿刺成(137．6~14_3)较对照组(61．5±2．4)明显增多(P≮0．01)。功后，植入导丝，拔除穿刺针，沿导丝植入5．0F导管(置入长3讨论度约3em

5、，将作为出血通道连接压力泵)，导管末端连接三通在动脉闭塞疾病模型相关研究中，文献[6]均有报道，采装置。于导管侧阀处手推普通肝素盐水(浓度125u／m1)2ml用Ameroid缩窄器造模的方法，本实验利用吸水橡胶膨胀的全身肝素化(于加压装置安装完成到本实验全部结束时，每特性自制缩窄器，以相同原理，成功建立新西兰白兔后肢动隔4h，给予1次肝素抗凝)，检查术野无活动性出血后，逐层脉闭塞疾病模型。同时，利用股动脉、颈动脉置管。压力泵加关闭切口。将短鞘固定于皮肤一I：。以无菌纱布覆盖。后于右压．成功模拟体外加压灌注。国外加压灌注实验研究中，采用侧腹股沟韧带下方1cm处，取纵型切口，暴露右侧股总动脉体外

6、循环机作为加压方式⋯，因体外循环机的设计限制，血压长约213m，在距缩窄器上端3c-m处，穿刺股总动脉，植入短最大提高至正常的3倍，而采用压力泵泵血的方式，压力可导管(导管长度约10em，植入长度约1em，将作为人血通道提高至正常的6～12倍，这使得进一步探索最适加压血压成连接压力泵)．导管末端接三通装置。于植入段导管中点血管为可能。本实验中也存在相当的不足：①实验动物的选择，新下预置一根7号慕丝线，检查术区无活动性出血后，给予无西兰白兔体格较小，血管管径较细，采用的连接管管径较粗，菌纱布覆盖创面。此时，体外加灌注装置已安装完毕。将压置管后白兔血管被完全封闭，如果预长期观察则难以实行。力泵与出

7、血管三通连接．打开m血管阀门，使压力泵内抽入可以选择体型较大的羊、猪、狗等动物进行改进。②采用压力10ml兔血(已抗凝后的血液)，关闭出血管阀门。取下压力泵抽血，泵血的过程中，实验动物下肢血管内的血液将间歇泵，在将压力泵与入血管一端三通连接，打开入血管阀门。此性的处于一种停滞状态，将不利于组织供血、供氧，还易造成时用预置的7号慕丝线环扎股总动脉及导管(为结扎牢固，血液中的成分贴壁，形成血栓，从而减