树鼩巴尔通体PCR方法的建立及初步应用-论文.pdf

《树鼩巴尔通体PCR方法的建立及初步应用-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、2014年6月中国比较医学杂志June，2014第24卷第6期CHINESEJOURNALOFCOMPARATIVEMEDICINEVo1．24NO．6e_1、技术方法＼-N穹树购巴尔通体PCR方法的建立及初步应用冯育芳，邢进，付瑞，巩薇，贺争鸣，岳秉飞(中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所，北京100050)【摘要】目的建立有效的树胸巴尔通体PCR检测方法，并进行初步应用。方法针对NCBI公布的巴尔通体序列设计3对引物，通过对我国主要流行菌株的扩增实验来确定1对引物，并进行体系优化、特异性和敏感性测试；运用该PCR方法对6O份树嗣样品进行检测，阳性样本进行序列测定。结果

2、所建树晌巴尔通体PCR检测方法特异性良好，灵敏度较高(2．0×10p~g／mL)，60份树驹样本中有15份阳性样本，通过序列测定证实树晌巴尔通体感染率为25％，与扩增结果完全相符，验证了该方法的可行性。结论该方法的建立为树鼢巴尔通体的检测奠定了基础。【关键词】树购；巴尔通体，检测；PCR；应用【中图分类号】R33【文献标识码】A【文章编号】1671—7856(2014)06-0069—04doi：10．3969．i．issn．1671．7856．2014．006．015EstablishmentandapplicationofaPCRmethodfordetectionofB

3、artonellaintreeshrewFENGYu—fang，XINGJin，FURui，GONGWei，HEZheng—ming，YUEBing—fei(InstituteforLaboratoryAnimalResources，NationalInstitutesforFoodandDrugControl，Beijing100050，China)【Abstract】0bjectiveToestablishaneffectivePCRassayfordetectionofBartonella，andapplicationofthisassayintreeshrew．Met

4、hodsSequenceofBartonellawasobtainedfromNCBIGenbank．Threepairsofprimersweredesignedbasedonthissequence．OnepairofprimerswasdeterminedthroughamplifyingthemajorstrainsinChina．SixtytreeshrewbloodsamplesweretestedwiththisPCRassay．Thepositiveamplifiedfragmentsweresequencedtoverifythereliabilityoft

5、hismethod．ResultsAPCRmethodfordetectionofBartonellaissuccessfullyestablished，withahighspecificityandthesensitivitywasof2．0×10‘’“g／mL．Amongthetested60bloodsamples，15positivecasesweredetected．Sequencingofthesamplesconfirmeda25％infectionrateofBartonellainthetreeshrews．wellconsistentwiththeampl

6、ificationresults，andverifiedtheapplicabilityofthisdetectionmethod．ConclusionTheestablishmentofthismethodprovidesthebasisfordetectionofBartonellaintreeshrew．【Keywords】Treeshrew；Bartonella，detection；PCR；Application树胸(treeshrew，Tupaiabelangeri)，树鼢科树物学、生殖生物学、免疫学等方面的作用也得到科鼢属的动物，其许多分子和细胞结构近似于人类，研

7、人员的肯定，因此，树嗣作为一种新型的实验动且对多种人类重要病毒易感，可作为重要人类病毒物资源正越来越受到重视。而微生物背景规范的动物模型；同时其在肿瘤学、内分泌学、神经生化检测是树嗣实验动物化的必备条件之一。[基金项目]实验动物新品种的种群建立与质量标准化研究(2011BAI15BO1)。[作者简介]冯育芳(1981一)，女，助理研究员，硕士，研究方向：实验动物微生物检测，E-mail：fyf307@126．corn。[通讯作者]岳秉飞(1960一)，男，博士，研究员，研究方向：实验动物遗传学。E—ma