实时荧光定量pcr检测巴尔通体方法的研究

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1、分类号８１单位代巧：１０４２２；Ｑ２０１２１１７１８密级：：学号■驅叫，、％ＳＨＡＮＤＯＮＧＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ硕±学位论文ＴｈｅｓｉｓｆｏｒＭａｓｔｅｒＤｅｒｅｅｇ（专业学位）论文题目：实时巧光定量ＰＧＲ检测己尔通体方法的研究－ｔｉｔｔＤｅｖｅｌｏｎｍｅｎｔｏｆｒｅａｌｔｉｍｅｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｕａｎａｉｖｅｑＰＣＲ化ｒｒａｉｄｄｅ化ｃｔｉｏｎｏｆ公ｐ作者姓名刘云彦心培养单位一生命科学学院．心—＾专业名称生物工程？指导教师陈忠科

2、副教授＜合作导师刘起Ｍ究胃而＆＜六扭＃：革Ｖ一．’，、＞？片－一．門＇／擁．．淵鴻瑪２０１５年５月９日分类号：Ｑ別单位代码：１０４２２：学号密级：２０１２１１７１８態山《、Ｊ、％硕±学位论文（专业学位）论文题目：实时巧光定量ＰＣＲ检测巴尔通体方法的研究－ＤｅｖｅｌｏｎｍｅｎｔｏｆｒｅａｌｔｉｍｅｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｑＰＣＲ化ｒｒａｐｉｄｄｅ化ｃｔｉｏｎｏｆ必ｗ妨Ｍｇ化Ｉ作者巧名刘云彦学院名疏生命科学学院专业学位名称

3、生物工程指导教师膝庞科盈１巧巧合作导师－刘泡專研究员＿＿２０１５年５月９日原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均己在文中明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。＇复涕、论文作者签名：別奋忘日期：＾关于学位论文使用授权的声明本人完全了解山东大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部口或机构送交论文的

4、复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权山东大学可ｙＡ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。（保密论文在解密后应遵守此规定）＾Ｗ传论文作者签名：导师签名：解曰期：叫吓山东大学硕±学位论文目录中；ｔ摘要ＩＡＢＳＴＲＡＣＴＩｌｌ缩略词表ＩＶ１．综述１１．１己尔通体流行概况１．２己１尔通体实验室诊断２１２．．１分胃培养２１２．２血．清学检测３１．２．３核酸诊断３１．３己尔通体感染疾病的治

5、疗１１１４．防控措施１１１．５２本研究的目的和意义１１４参考：＾献２．应用高分辨率烙解曲线技术检测巴尔通体１８２．１前言２０２１２．２＃料和方法２２１ＤＮＡ１．．菌株和生物样本２２．２．２主要仪器设备与试剂２１２２通体菌株的培养．．３己尔２２２．２．４模板ＤＮＡ提取２２２．２．５範基因引物筛选与合成２３２．２．６常规ＰＣ民扩增：２３２．２ＮＡ．７目的Ｄ的回收：２３２．２４．２８克隆反应体系的建立２．２．９重组质粒的构建２４２．２．１０质粒ＤＮＡ的

6、提取２５２２ｎ５．．反应体系及反应参数２２．２１２；２．反应条件优化６２２．１３２６．特异性分析２．２．１４敏感性分析％２．２．１５重复性分析２７２．３结Ｓ２７２Ｐ２．３．１常规ＣＲ扩増结果７２．３．２阳性克隆的ＰＣＲ鉴定结果２７２ＢｈＭＭ基．３．３因的测序结果２８２．３．４质粒拷贝数浓度换算２８２．３．５应条件的优化２８２．３．６特异性检测３０２３．７．敏感性检测３１ｉ山东大学硕±学位论文２．３．８重复性分析３３２．４讨论３３参考

7、文献３５３．应用双重高分辨率烙解曲线技术检测也内膜炎相关己尔通体３６３．１前言３８３．２材料和方法４０３．２．１茜株和生物样本ＤＮＡ４０３．２．２主要仪器设备与试剂４０３．２．３祀基因筛选、引物的设计与合成４０３１．２．４标准品的制备４３．２．５质粒拷贝数浓度换算４１４１３．２．６反应体《及反应参数３．２．７反应条件优化４１３．２．８双重ＨＲＭ特异性分析４１３．２．９敏感性分析４２３４２．２．１０双重ＨＲＭ重复性分析．４２３３结果．１反应条件的优化４２３

8、３．３．２４．３特异性检测６４７３３．３敏感性检测３．３．４重复性分析５２３．４讨论５２参考文献５４４、