农户自制酸菜中益生潜力乳酸菌的分离鉴定-论文.pdf

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1、第28卷第2期齐鲁工业大学学报Vo1．28No．22014正5月JOURNALOFQILUUNIVERSITYOFTECHNOLOGYMav．2014文章编号：1004—4280(2014)02—0034—03农户自制酸菜中益生潜力乳酸茵的分离鉴定郝永伟，吕蕾，刘新利(齐鲁工业大学食品与生物工程学院，山东济南250353)摘要：从农户自制酸菜中分离，鉴定具有益生潜力的优质乳酸菌菌株。根据菌落形态，革兰氏染色和透明圈，从酸菜汁中初步分离到40株乳酸菌菌株，以耐人工胃液为筛选指标，从初筛菌中选择耐酸能力强的乳酸菌，用16sRNA分子生物学方法鉴定菌种。比较筛选菌的耐胆碱能力，产酸性能以及抑菌能力，

2、从中挑选出综合能力最好的菌株。分离得到一株耐酸，耐人工肠液，耐胆碱，产酸能力强，对大肠杆菌，金黄色葡萄球菌和烟曲霉都具有抑制能力的植物乳杆菌。关键词：酸菜；乳酸菌；筛选；16sRNA鉴定中图分类号：TS201．3文献标识码：ASeparationandidentificationoflacticacidbacteriawithprobioticpotentialfromchinesessuerkrautHAOYong—wei，LVLei，LIUXin—li(SchoolofFoodandBioengineering，QiluUniversityofTechnology，Jinan250353，

3、China)Abstract：LacticacidbacteriawithpotentialcanbeseparatedandidentifiedtobeusedasprobioticsfromChinesesauerkraut．Accordingtocolonymorphology，gramfaerbungandtransparentzone，40strainsoflacticacidbacteriapreliminarywerescreened，thescreenedstrainswastestedbyartificialgastricjuice，onlythosehavingabilit

4、ytosurviveinartificialgastricjuicemorethantwohourswillbeselected．Toidentitystrains，molecularmethodbasedon16sRNAwasused．Furthermore，choline-resistance，producingacidandbacteriostatwerecomparedamongtheirstrains．Atlast，wescreenedoutaexcellentplantplantarumthatresistanceto?artificialintestinaljuice，choli

5、ne，withtheabilitytoproduceacidandinhibitingE．coli、staphylococcusaureusandsmokeaspergillus．Keywords：Chinesesauerkraut；Lacticacidbacteria；Screening；16sRNAIdentification菌发挥益生功能的前提条件是能够在肠道中的胁迫0引言环境如，胃肠道中生存下来，尤其是低pH的动物胃中，还要能在含胆碱的肠道中繁殖。酸菜在我国有悠久的历史，在北方地区广受欢1材料和方法迎。在酸菜中乳酸菌含量很高，对酸菜酸化和风味的形成具有重要的作用。同时一些具有益生功1．

6、1材料能的乳酸菌能够改善动物新陈代谢、提高营养物质(1)分离材料：农户自制酸菜吸收和利用、提高免疫力、减少环境污染。。乳酸(2)主要试剂：蛋白胨、牛肉膏、酵母膏、柠檬酸收稿日期：2014—03—11基金项目：山东省科技支撑计划项目(2012GSF12107)作者简介：郝永伟(1986一)，男，内蒙古自治区包头市人，齐鲁工业大学在读硕士研究生，研究方向：生物制药通讯作者：刘新利，男，教授，博士，研究方向：微生物制药，E—mail：vip．1xl@163．con．齐鲁工业大学学报第28卷2．4耐胆碱试验是一种生存能力强，可以安全使用的益生菌。不同不同菌株的耐胆碱能力不同，3株菌在0．3％的菌株的耐

7、受性差别很大，少数性状优良的植物乳杆胆碱浓度下都不能生长。胆碱浓度为0．15％时，抑菌能够达到益生菌的标准。本实验从酸菜中筛选一制乳酸菌生长，对lac一1、lac一2的抑制较强，lac-3株能够在人工胃液中存活两小时以上，而且耐人工的抗胆碱能力显著强于其它两株菌(表1)。肠液能力较强，产酸性好，同时又广谱抑菌能力的植表1乳酸菌耐胆碱能力(w／v％)物乳杆菌。实验结果显示，耐胃液能力最强的菌株Lac