卡那霉素人工抗原的制备及鉴定-论文.pdf

《卡那霉素人工抗原的制备及鉴定-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、中回摩亏通报2014，30(17)：26-30ChineseAgriculturalScienceBulletin卡那霉素人工抗原的制备及鉴定王爱萍，栗宁，祁艳华，段倩倩，郑伟，王新洲，裴艳艳，周景明(郑州大学生命科学学院，郑州450001)摘要：为了人工制备卡那霉素完全抗原。将卡那霉素标准品与牛血清白蛋白(BsA)或卵清白蛋白(OVA)4~联，制备人工抗原。利用两种不同的偶联方法：碳二亚胺法(EDC)和戊二醛法(GDA)，分别制备出KAN．BSA(作为免疫原)，KAN．GDA．OvA(作为包被原)。利用SDS．PAGE凝胶电泳鉴定和动物免疫试验等，鉴定了完全

2、抗原偶联情况。结果显示：制备的卡那霉素完全抗原能刺激小鼠机体产生相应抗体，且抗血清效价均达到1：2．56x10‘，其中一号小鼠的IC。值为22．28ng／mL，说明完全抗原免疫原性良好。抗原制备成功。关键词：卡那霉素；人工抗原；碳二亚胺法；戊二醛法中图分类号：S8文献标志码：A论文编号：2014．3318SynthesisandIdentificationofKanamycinCompleteAntigenandPreparationofPolyclonalAntibodyAgainstKanamycinWangAiping，LiNing，QiYanhua，D

3、uanQianqian，ZhengWei，WangXinzhou，PeiYanyan，ZhouJingming(ZhengzhouUniversity，Zhengzhou450001)Abstract：Thepurposeofthisexperimentwaspreparingkanamycincompletelyartificialantigens．Firstly，kanamycinstandardwasreactedwitllbovineserHmalbumin(BSA)orovalbumin(OVA)topreparekanamycinartificia

4、lantigens．Twodiferentcouplingmethodscarbodiimide(EDC)andglutaraldehyde(GDA)wererespectivelypreparedKAN—BSA(asanimmunogen)andKAN—GDA—OVA(asthecoatingantigen)．BothoftheSDS-PAGEgelelectrophoresisandtheanimalimmunizationexperimentidentifiedtheantigen—’coupledcase．Theresultsshowedthat，th

5、epreparedkanamycincompleteantigencouldstimulatethebodiestoproduceantibodiesinmice，andtheantiserumtiterreached1：2．56×10，TheIC50ofthemicewas22．28ng／mL．Theresultsillustratedtheimmunogenicityofthecompleteantigensweregoodandthepreparationsoftheantigensweresuccessfu1．Keywords：Kanamycin；ar

6、tificialantigen；carbodiimidemethod；glutaraldehydemethod0引言便和价格便宜等优点【3】。但卡那霉素也具有一定的耳卡那霉素(Kanamycin，KAN)属于半抗原物质不能毒性和肾毒性[41，若人类长期使用含有过量卡那霉素刺激机体产生相应抗体，只有与大分子蛋白偶联制备超标的动物源性食品，可能会引起中毒反应。卡那霉素完全抗原后，才具有免疫原性n1。卡那霉素为了保证人类健康，日本和欧盟等国家和地区均在兽药领域里被用来治疗痢疾、肺炎等疾病口。卡那对猪组织中KAN的最大残留限量(MRLs)进行了规霉素具有水溶性好、抗菌

7、谱广、细菌耐药性低、用药方定：肌肉为100~g／kg，肝脏为600~tg&g，肾脏为基金项目：国家科技支撑计划子课题项目“食品中重要危害物抗体库的建立及产品研发”(20111BAK10B01．17)；河南省重点科技攻关项目“噬菌体展示技术淘选赭曲霉毒素模拟表位研究”(122102310629)。第一作者筒介：王爱萍，女，1970年出生，河南唐河人，教授，博士，硕士研究生导师，从事分子免疫学和免疫学检测技术研究。E·mail：pingaw@zzu．edu．on。通讯作者：周景明，男，1972年出生，河南南阳人，副教授，博士，硕士研究生导师，从事分子免疫学和免疫学

8、检测技术研究。通信地址：450001河