正交试验优化超声法提取黄芪总黄酮工艺研究.pdf

《正交试验优化超声法提取黄芪总黄酮工艺研究.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、试糖类[1】。其中黄酮类成分具有多种药理活性，可以1．4．1标准曲线的绘制精确吸取芦丁标准液验调节免疫系统，消除自由基、抗氧化、延缓衰老，(0．1mg／mL)0．0，1．0，2．0，3．0，4．0，5．OraL分别加入研改善心功能状态，抑菌抗病毒，抗癌等功效】。6只25mL容量瓶中；然后各加入2％NaNOlmL，究为探索提取黄芪总黄酮最适宜条件，本试验以黄芪总黄酮为质量控制指标，比较了常规和超表1标准曲线制作数据声两种提取方法的提取效果，并且采用正交试验标准液体积(m”0．01．02．03．04．05．0设计，从提取剂的浓度、料液比、提取时间及提取次数四个指标对超声

2、提取工艺进行了系统研究，以确定最佳提取方法，进而为黄芪在临床上的广泛应用提供技术依据。1材料与方法静置5min；加入5％A1(NO3)3lmL静置5min；加1．1试验样品黄芪根，内蒙古包头产。入lmol／LNaOH12mL，加水定容。以0为空白在1．2试验仪器仪表恒温水浴锅f上海申光仪器510nm处测定系列吸光度(表1)。有限公司)、旋转蒸发仪(上海申生科技有限公司)、由标准曲线求得回归方程Y=0．099X+722s可见分光光度计(上海分析仪器厂)、超声波0．0004225(Y：浓度，mg／mL；X：吸光值)，相关系数破碎仪(上海宁商超声仪器有限公司)。R=0．9

3、997。l-3试剂的配制芦丁标准溶液(0．1mg／mL)：精1．4．2样品含量测定将提取获得的黄芪总黄确称取芦丁(上海第二试剂厂)10mg，用60％乙醇酮浸膏溶于50mL85％乙醇中，置于lOOmL容量溶解，移入lOOmL容量瓶，定容至刻度，摇匀备瓶中定容。精密吸取定容后的液体lmL于100ml收稿日期：2014一Ol—O2容量瓶中，用60％乙醇定容。按标准曲线制备方作者简介：胡文举(1979一)，硕士，陕西大荔人，河南广播电法测定吸光度，并按照公式1计算含量。视大学讲师。E—mail：hwj4303@163mmC=Cx×V2×V2／m基金项目：河南省科技攻关项目(

4、102102110107)中兽医j8f2014年第3期(总第178期)_，'c：样品中黄酮含量(mg／g)；C：由标准曲线求通过预试验，在乙醇浸提法和超声波法中选得的黄酮含量(mg／mL)；Vl：第1次定容体积择最优的提取方法，并在单因素试验的基础上，(m1)；V2：第2次定容体积(m1)；m：称取药品量选取4因素3水平进行正交试验。正交试验设计(g)。见表2．1．5提取方法的选择表2超声提取法正交试验因素及水平1．5．1常规提取法因素，J＼"I-将适量干燥黄芪根粉碎后过50目筛，称取乙醇浓度料液比(倍)提取时间(min)次数过筛的黄芪粉末50g，加入8倍95％乙醇

5、，在150％615l70~C条件下回流提取3次，过滤，并用95％乙醇270％8302冲洗滤渣2次，合并滤液和冲洗液，回收溶剂至395％1O453浸膏。1．5．2超声提取法将适量干燥黄芪根粉碎后2结果与分析过50目筛，称取过筛的黄芪粉末50g，按实验设2．1两种提取方法对黄芪总黄酮提取效果的比计加入相应浓度和体积的乙醇，在30℃条件下按较通过常规法和超声提取法两种方法对黄芪照试验设计进行超声处理，然后过滤，用95％乙中总黄酮有效成分进行提取，得到如下结果(见醇冲洗滤渣2次，合并滤液，后续操作与常规提表3)。从提取物中有效成分的吸光度和提取率可取法相同。以看出超声法提取

6、的效果优于常规法。1．5-3超声提取法单因素试验对提取温度、乙2．2单因素试验结果试验分别在1O℃、20℃、醇浓度、料液比、超声作用时间、提取次数进行单30℃、4O℃、50℃、60℃、70℃、80℃、90℃条件下因素提取试验，分别考查这5个因素对黄芪总黄对黄芪总黄酮进行提取，实验结果见图1。由图1_酮提取效率的影响。可知，在10℃到30℃之间，提取效率随着温度升试(1)提取温度对提取效果的影响。称取黄芪高而提高，当温度达到30％以上时，提取效率比验粉末50g，加入8倍料液比的70％乙醇，分别在较稳定，并不随温度升高而提高。此结果与李慧研20℃、30℃、40℃、5Oc

7、C、60℃、70℃、80℃、9O静等的研究结果相似。随着温度的提高，分子运究下，超声提取2次，每次提取30分钟，进行试验。动加快，黄酮分子更容易从细胞中游离出来[31，但(2)乙醇浓度对提取效果的影响。称取黄芪是当温度过高时，黄芪中其他成分溶解度增大，粉末50g，分别加入8倍料液比的30％、40％、会影响黄酮含量的测定[4]。由此，在正交试验时将50％、60％、70％、80％、90％乙醇，在30℃条件下，提取温度选取在3O℃。超声作用25min，超声作用2次进行试验。随着乙醇浓度的提高，提取效率也不断地提(3)料液比对提取效果的影响。称取黄芪粉高，当乙醇浓度达到