正交试验法优选乌拉尔甘草总黄酮提取工艺研究

《正交试验法优选乌拉尔甘草总黄酮提取工艺研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、正交试验法优选乌拉尔甘草总黄酮提取工艺研究[摘要]：目的：用正交法研究提取甘草中的甘草总黄酮类化合物最佳提取工艺。方法：选取乙醇浓度、提取时间、提取温度、料液比及提取次数进行单因素试验，采用正交法，以甘草总黄酮类化合物得率作为检测指标。结果：经过正交试验得出的最佳工艺条件为：乙醇浓度80%，料液比1:20，提取时间2h，提取温度70℃，回流提取次2次。结论：该方法提取率高，稳定性好，操作简便，适合工业化生产。关键词：甘草总黄酮正交试验提取工艺吸光度正交试验法优选乌拉尔甘草总黄酮提取工艺研究[摘要]：目的：用正交法研究提取甘草中的甘草总黄酮类化合物最佳提取工艺。方法：

2、选取乙醇浓度、提取时间、提取温度、料液比及提取次数进行单因素试验，采用正交法，以甘草总黄酮类化合物得率作为检测指标。结果：经过正交试验得出的最佳工艺条件为：乙醇浓度80%，料液比1:20，提取时间2h，提取温度70℃，回流提取次2次。结论：该方法提取率高，稳定性好，操作简便，适合工业化生产。关键词：甘草总黄酮正交试验提取工艺吸光度甘草为双子叶植物豆科甘草，胀果甘草，或光果甘草的根及根茎。始载于《神农本草经》，列为上品。甘草性平，味甘，归十二经。有解毒、祛痰、止痛、解痉以至抗癌等药理作用。在中医上，甘草补脾益气，滋咳润肺，缓急解毒，调和百药。临床应用分“生用”与“蜜炙

3、”之别。生用主治咽喉肿痛，痛疽疮疡，胃肠道溃疡以及解药毒、食物中毒等；蜜炙主治脾胃功能减退，大便溏薄，乏力发热以及咳嗽、心悸等。甘草是我国传统常用中草药之一，也是我国重要的植物资源[1]第7页。甘草黄酮类成分是甘草中最重要的活性成分之一，具有抗氧化、抗肿瘤、增强心血管功能、增强免疫力等作用[2-5]。1．仪器与试剂2材料与方法3结果与分析4结论与讨论2.1材料乌拉尔甘草，粉碎，待用。对照品，芦丁。乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠等，均国产分析纯试剂。2.2仪器FZ102五星植物试样粉碎机（北京永光明医疗仪器厂）、DZKW-4型双列六孔水浴锅（北京中兴伟业仪器有限公司

4、）、T6新悦-可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）、SHB-3循环水多用真空泵（郑州杜甫仪器厂）、FA1604N电子天平（上海精科仪器厂）、回流装置、圆底烧瓶、烧杯、滤纸、玻璃棒、滴管等。3.方法与结果3.1总黄酮的含量测定以芦丁为标准品，利用紫外分光光度法测定待测样品总黄酮含量。[6~8]3.1.1对照品溶液的制备称取芦丁对照品10mg，用95%的乙醇溶解，摇匀，定容至10ml，使之成为浓度为1mg/ml的芦丁标准品溶液，作为贮备液备用。3.1.2供试品溶液的制备称取乌拉尔甘草若干，粉碎，过40目筛，称取粉碎样2.0g，置于250ml平底烧瓶，采用乙醇回

5、流法提取（提取溶剂为80%乙醇、液料比为1:20、提取温度为70℃、提取时间为2h、提取2次）。提取液抽滤、转至25ml容量瓶，定容，摇匀，待测。3.1.3比色原理及最大吸收波长选择乌拉尔甘草含多种黄酮类化合物，其黄酮母核所含的游离羟基在适当的介质条件下能与金属铝离子形成络合物而显色。用一定浓度的亚硝酸钠溶液、硝酸铝溶液、氢氧化钠溶液显色，于450-550nm处扫描，对照品和供试品溶液的吸收光谱均在510nm处有最大吸收，因此测定波长选择510nm。3.1.4标准曲线的制备称取芦丁对照品10mg，用30%的乙醇溶解，摇匀，定容至10ml，使之成为浓度为1.00mg/

6、ml的芦丁标准品溶液，作为贮备液备用。第7页量取上述溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6ml，分别加水至3ml，加5%亚硝酸钠溶液0.5ml，放置6min，加10%的硝酸铝溶液0.5m1，摇匀、放置6min后加5%的氢氧化钠溶液2.5m1，混匀、放置15min后蒸馏水定容至10ml,放置15min。用紫外分光光度计在500nm处测吸光度，以对照品浓度为横坐标，吸光度为纵坐标做标准曲线。图1芦丁标准品标准曲线3.1.5供试液总黄酮含量的测定分别量取待测液1ML置10ML的容量瓶，按标准曲线项下操作显色，测定吸收度，利用吸光度及回归方程计算各样品总黄酮百分

7、含量（T）计算公式为：T=C(mg/ml)*N*V(ml)/W(mg)*100%N为样品稀释倍数；V为提取液定容体积；W为样品质量。3.2单因素试验与结果3.2.1乙醇浓度对提取率的影响准确称取粉碎样2.0g（5份），置于250ML平底烧瓶，分别加入50%，60%，70%，80%，90%乙醇40ml,采用乙醇回流法提取（提取温度为70℃，提取时间为2h，提取2次）。提取液抽滤，转至50ml容量瓶，定容，测定，计算提取率。结果见图2。第7页图2乙醇浓度对提取率的影响从图2中可以看出，乙醇浓度为80%时，提取率达到最高。在试验中，随着乙醇浓度（50%~90%）的增加