正交试验法优化香附总黄酮提取工艺论文

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1、正交试验法优化香附总黄酮提取工艺论文【摘要】目的优选香附总黄酮的提取工艺。方法以乙醇体积分数、料液比、提取时间、提取次数为考察因素，以总黄酮含量为测定指标，采用正交试验优化香附总黄酮的最佳提取工艺。结果香附总黄酮的最佳提取工艺为乙醇体积分数70%、料液比1∶15、提取时间45min、提取次数为2次。结论该提取工艺稳定，适合香附总黄酮的提取。【关键词】香附;总黄酮;正交试验;提取工艺Abstract:ObjectiveTooptimizetheextractiontechnologyoftotalflavonoidsfromCyperusRotundu

2、s.MethodsOrthogonalexperimentaterialandsolvent,extractingtimeandfrequencyasfactors.ResultsTheoptimalextractiontechnologyaterialtosolventof1∶15,extractingfor45minand2times.ConclusionTheextractiontechnologyissteadyandsuitableforextractingtotalflavonoidsfromCyperusRotundus.Keyent;

3、extractiontechnology香附为莎草科多年生草本莎草(CyperusrotundusL.)的干燥根茎，性辛、微苦、微甘、平,归肝、三焦经，具有疏肝理气、调经止痛的功效1。香附主要含有挥发油、黄酮类化合物、三萜类化合物、甾醇类、生物碱、糖类、酚类等化学成分2。现有研究已证明黄酮类化合物在治疗冠心病、老年性痴呆、脑血栓、神经系统疾病等方面有显著效果，还具有抑菌、抗癌等作用，且无副作用.freel×14cm)。1.2试药香附药材购自安徽亳州药材市场，经湖北医药学院附属人民医院药学部雷龙副教授鉴定为莎草科植物(CyperusrotundusL.

4、)的干燥根茎;芦丁对照品(批号：10080-200306)购自中国药品生物制品检定所;聚酰胺(30～60目，浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂);水为重蒸水;其余试剂均为分析纯。2方法与结果2.1供试品溶液的制备取香附粉末(过2号筛)3.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加石油醚(60~90℃)50mL，超声提取30min，弃去石油醚液，待样品中残留的石油醚全部挥去后，按实验要求加入不同体积乙醇(不同体积分数)超声提取不同时间、次数，放凉后滤过，滤液置80℃水浴锅上浓缩至适量。称取聚酰胺3g，以样品溶液拌样后置80℃水浴锅上加热至无醇味，装入层析柱中。用蒸

5、馏水100mL、20%(体积分数)乙醇50mL、60%(体积分数)乙醇300mL依次进行洗脱，收集60%(体积分数)乙醇洗脱液，置水浴锅上浓缩，用60%(体积分数)乙醇定容至25mL，即得。2.2对照品溶液的制备精密称取已干燥至恒重的芦丁对照品20.08mg，置10mL容量瓶中，加60%(体积分数)乙醇溶解至刻度，摇匀，即得。2.3测定波长的选择取供试品溶液和对照品溶液各1mL，置于10mL容量瓶中，加入5%(质量浓度)NaNO2溶液0.3mL，摇匀，放置6min，再加入10%(质量浓度)Al(NO3)3溶液0.3mL，摇匀，再放置6min，加入4%

6、(质量浓度)NaOH溶液4mL，加60%(体积分数)乙醇定容到10mL，放置15min，即得。用紫外分光光度计进行扫描，结果两者在499.9nm处均有最大吸收，故选择500nm作为测定波长。2.4线性关系考察分别精密量取芦丁对照品溶液0.2、0.5、1.0、1.5、2.0mL置25mL容量瓶中，按照“2.3”项下自“加入5%(质量浓度)NaNO2溶液0.3mL”起进行操作，于500nm处测定其吸光度。以吸光度(A)为纵坐标，芦丁质量浓度(ρ)为横坐标进行线性回归，得回归方程为A=27.455ρ+0.0187，r=09990。结果表明芦丁对照品的质量

7、浓度在0.04016～04016mg·mL-1范围内与吸光度呈良好的线性关系。2.5单因素考察以乙醇体积分数、料液比、提取时间为考察因素，考察其对总黄酮提取率的影响。结果见图1。PSa6381〗A.乙醇体积分数;B.料液比;C.提取时间图13个因素对总黄酮提取率的影响Figure1Theeffectontheextractionyieldof3factors由图1可知，乙醇体积分数在80%时香附总黄酮提取率最高，当乙醇体积分数继续提高，总黄酮提取率反而下降;总黄酮提取率随着料液比的增大而升高，当料液比为1∶15时达到最大值;提取时间为40min时总

8、黄酮提取率最高。2.6正交试验在单因素考察的基础上，选择乙醇体积分数(A)、料液比(B)、提取时间(C)、提