正交试验法优化香附总黄酮提取工艺的论文

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1、正交试验法优化香附总黄酮提取工艺的论文【摘要】目的优选香附总黄酮的提取工艺。方法以乙醇体积分数、料液比、提取时间、提取次数为考察因素，以总黄酮含量为测定指标，采用正交试验优化香附总黄酮的最佳提取工艺。结果香附总黄酮的最佳提取工艺为乙醇体积分数70%、料液比1∶15、提取时间45min、提取次数为2次。结论该提取工艺稳定，适合香附总黄酮的提取。【关键词】香附;总黄酮;正交试验;提取工艺　abstract:objectivetooptimizetheextractiontechnologyoftotalflavonoidsfromcyperusrotundu

2、s.methodsorthogonalexperimentaterialandsolvent,extractingtimeandfrequencyasfactors.resultstheoptimalextractiontechnologyaterialtosolventof1∶15,extractingfor45minand2times.conclusiontheextractiontechnologyissteadyandsuitableforextractingtotalflavonoidsfromcyperusrotundus.　　keyent;

3、extractiontechnology　　香附为莎草科多年生草本莎草(cyperusrotundusl.)的干燥根茎，性辛、微苦、微甘、平,归肝、三焦经，具有疏肝理气、调经止痛的功效[1]。.香附主要含有挥发油、黄酮类化合物、三萜类化合物、甾醇类、生物碱、糖类、酚类等化学成分[2]。现有研究已证明黄酮类化合物在治疗冠心病、老年性痴呆、脑血栓、神经系统疾病等方面有显著效果，还具有抑菌、抗癌等作用，且无副作用，已开发出许多种药品和保健食品[3-5]。已有的文献资料未见有关香附黄酮类物质提取工艺的研究报道，故本试验对香附总黄酮的提取工艺以及含量进行初步研究，

4、为香附总黄酮的进一步研究开发提供资料。　　1仪器与试药　　1.1仪器　　agilent8453e型紫外-可见分光光度计(美国安捷伦公司);bp211d电子分析天平(德国sartorius);kq-500超声仪(昆明市超声仪器有限公司，功率500×14cm)。　　1.2试药　　香附药材购自安徽亳州药材市场，经湖北医药学院附属人民医院药学部雷龙副教授鉴定为莎草科植物(cyperusrotundusl.)的干燥根茎;芦丁对照品(批号：10080-200306)购自中国药品生物制品检定所;聚酰胺(30～60目，浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂);水为重蒸水;其余试

5、剂均为分析纯。　　2方法与结果　　2.1供试品溶液的制备　　取香附粉末(过2号筛)3.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加石油醚(60~90℃)50ml，超声提取30min，弃去石油醚液，待样品中残留的石油醚全部挥去后，按实验要求加入不同体积乙醇(不同体积分数)超声提取不同时间、次数，放凉后滤过，滤液置80℃水浴锅上浓缩至适量。称取聚酰胺3g，以样品溶液拌样后置80℃水浴锅上加热至无醇味，装入层析柱中。用蒸馏水100ml、20%(体积分数)乙醇50ml、60%(体积分数)乙醇300ml依次进行洗脱，收集60%(体积分数)乙醇洗脱液，置水浴锅上浓缩，用60%

6、(体积分数)乙醇定容至25ml，即得。　　2.2对照品溶液的制备　　精密称取已干燥至恒重的芦丁对照品20.08mg，置10ml容量瓶中，加60%(体积分数)乙醇溶解至刻度，摇匀，即得。　　2.3测定波长的选择　　取供试品溶液和对照品溶液各1ml，置于10ml容量瓶中，加入5%(质量浓度)nano2溶液0.3ml，摇匀，放置6min，再加入10%(质量浓度)al(no3)3溶液0.3ml，摇匀，再放置6min，加入4%(质量浓度)naoh溶液4ml，加60%(体积分数)乙醇定容到10ml，放置15min，即得。用紫外分光光度计进行扫描，结果两者在499.9

7、nm处均有最大吸收，故选择500nm作为测定波长。　　2.4线性关系考察　　分别精密量取芦丁对照品溶液0.2、0.5、1.0、1.5、2.0ml置25ml容量瓶中，按照“2.3”项下自“加入5%(质量浓度)nano2溶液0.3ml”起进行操作，于500nm处测定其吸光度。以吸光度(a)为纵坐标，芦丁质量浓度(ρ)为横坐标进行线性回归，得回归方程为a=27.455ρ+0.0187，r=09990。结果表明芦丁对照品的质量浓度在0.04016～04016mg·ml-1范围内与吸光度呈良好的线性关系。　　2.5单因素考察　　以乙醇体积分数、料液比、提取时间

8、为考察因素，考察其对总黄酮提取率的影响。结果见图1。[psa6381〗a.乙醇体