天山岩黄芪根中总黄酮超声提取工艺研究

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1、天山岩黄芪根中总黄酮超声提取工艺研究作者：海力茜·陶尔大洪，乌莉娅·沙吾提，阿布都哈米提·阿不都克依木【摘要】　　目的确定天山岩黄芪中总黄酮的优选超声提取工艺。方法采用正交实验法，考察溶剂量，提取次数，超声时间，溶剂浓度对提取率的影响，以芦丁为标准品，用紫外分光光度标准曲线法测定含量。结果所考察的因素中，天山岩黄芪总黄酮的提取影响程度为：溶剂浓度＞提取时间＞溶剂量＞提取次数，即乙醇浓度７０％，提取时间３０ｍｉｎ，体积为４０ｍｌ，提取次数为３次。结论超声乙醇提取法最佳工艺组合Ａ３Ｂ３Ｃ３Ｄ３，可为利用天

2、山岩黄芪工业生产黄酮类药用成分提供科学依据。【关键词】天山岩黄芪总黄酮正交实验法　　Abstract：ObjectiveＴｏｏｐｔｉｍｉｚｅｔｈｅｕｌｔｒａｓｏｎｉｃｅｘｔｒａｃｔｉｏｎconditionsｆｏｒｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｆｒｏｍSemenoviiregeltＨｅｒｄ．MethodsThetotalｆｌａｖｏｎｏｉｄｗａｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙＵＶ－ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｉｃｍｅｔｈｏｄ，tｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｒａｔｅｏｆｆｌａｖｏｎｏｉｄｏｐｔｉｍｉｚｅｄｃｏｎｄｉｔｉｏｎ（ｅｔｈａ

3、ｎｏｌｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ，ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃｔｉｍｅ，ｓｏｌｖｅｎｔｑｕａｎtｉｔｙａｎｄｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｉｍｅｓ）ｗａｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｄｅｓｉｇｎ．ResultsＴｈｅｏｒｄｅｒｏｆｆａｃｔｏｒｓｔｏａｆｆｅｃｔｔｈｅｆｌａｖｏｎｏｉｄｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｗａｓｅｔｈａｎｏｌｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ＞ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｉｍｅｓ＞ｓｏｌｖｅｎｔｑｕａｎtｉｔｙ＞ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃｔｉｍｅ．ConclusionＴｈｅｏｐｔｉｍｕｍｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ

4、ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎtechnologiesｗｅｒｅＡ３Ｂ３Ｃ３Ｄ３.　　KeysemenoviirｅｇｅｌｔＨｅｒｄ；Ｔｏｔａｌｆｌａｖｏｎoid；Ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｔｅｓｔ　　天山岩黄芪HedysarumsemenoviiＲｅｇｅｌｅｔＨｅｒｄ为豆科岩黄芪属（HegysarumＬｉｎｎ）植物，分布于新疆乌鲁木齐、伊犁、阿勒泰、塔城等地区。该属植物具有补气固表，利尿托毒，排脓，敛疮生肌之功能。药理研究证明：有强心、利尿、降压、护肝、抗肾炎作用。　　化学成分较复杂，富含黄酮类化合物、木质素类、生物碱

5、类、香豆苯醚类、氨基酸［１～６］、多糖类等。其中具有生物活性的黄酮类化合物具有显著的预防和治疗心血管疾病，具有抗氧化、抗衰老及增强机体免疫等功能。近年来研究表明黄酮类化合物在食品上的应用也越来越广泛，如天然色素、甜味剂、抗氧化剂等。为综合评价药材质量，本研究首次采用正交实验法考察超声提取天山岩黄芪根中总黄酮的优选提取条件。　　１　材料与仪器　　天山岩黄芪６月份采自新疆乌鲁木齐东山区采后洗净、晒干、６０℃烘干粉粹后过６０目筛备用。由北京大学药学院天然药物学系杨虎彪教授鉴定为天山岩黄芪根Hedysarum

6、semenoviiＲｅｇｅｌｔＨｅｒｄ。　　ＴＵ－１８００型紫外可见分光光度计；ＳＫ８２１０ＨＰ型超声清洗机；芦丁对照品（中国药品生物品检定所）；电子天平（梅特勒－托利多上海仪器有限公司生产）；所用试剂均为分析纯。　　２方法［７］与结果　　２．１对照品溶液的制备精密称取在１０５℃干燥恒重的芦丁对照品２０ｍｇ于１００ｍｌ容量瓶中，用６０％乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得０．２００ｍｇ／ｍｌ标准贮备液备用。　　２．２供试品溶液的制备精密称取天山岩黄芪根粉１ｇ，加７０％乙醇２０ｍｌ，提取２次，超声提取３０ｍ

7、ｉｎ，过滤，摇匀。再精密吸取２ｍｌ置２５ｍｌ容量瓶中，加６０％乙醇稀释至刻度，摇匀，备用。　　２．３测定波长的选择分别取对照品溶液及供试品溶液各１ｍｌ按“２．４”项下依法操作，用紫外可见分光光度计将对照品溶液及供试品溶液在２００～７００ｎｍ进行扫描，结果发现对照品溶液及供试品溶液在３５７ｎｍ附近有最大吸收峰，实验中选择测定波长为３５７ｎｍ。　　　　２．４线性关系考察精密量取对照品溶液０．１，０．２，０．４，０．５，０．６，０．８ｍｌ置５ｍｌ容量瓶中加乙醇稀释至刻度，摇匀，制成含芦丁４～３２μｇ／ｍｌ的

8、系列标准溶液。以乙醇为空白，在３５７ｎｍ波长处测定其吸光度，结果表明芦丁在４～３２μｇ／ｍｌ范围内符合Ｂｅｅｒ定律，吸光度与浓度呈良好的线性关系，其回归方程为：　　A＝１７．６３C＋０．０４６９，r＝０．９９９６　　２．５提取物中总黄酮含量的测定精密吸取供试品约１０ｍｌ于离心试管中，离心４０００ｒ／ｍｉｎ，１０ｍｉｎ，取上清液５．０ｍｌ按“２．４”项下方法处理，测定吸光度值，代入回归方程，计算总黄酮含量。　　２．５．１不同乙醇浓度对提取效果的影响以分别以