木蝴蝶总黄酮超声提取工艺研究

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1、木蝴蝶总黄酮超声提取工艺研究【摘要】目的研究超声辅助提取木蝴蝶种子中总黄酮的最佳工艺条件。方法以黄芩苷为对照品，木蝴蝶总黄酮得率为考察指标，通过正交实验法优选超声提取总黄酮的最佳工艺。结果所考察因素中，木蝴蝶总黄酮的提取工艺中各因素影响程度为：超声时间(D)>超声功率(C)>料液比(B)>乙醇浓度(A)，最佳水平搭配为A1B3C2D3。结论木蝴蝶总黄酮最佳提取工艺参数为：乙醇浓度为60%，料液比：1∶30，超声提取1次，时间50min，超声功率：210ethodsSingle-fa

2、ctoranalysisandorthogonaldesignizetheextractionprocessaccordingtoextractionyieldoftotalflavonoidsinthesameconditions.ResultsTheorderoffactorseofultrasonictreatment>ultrasoundpoaterial>ethanolconcentration,andthebestmatchindicumcanbeestablishedasf

3、olloe50minfor1timeandultrasoundpoindicum;Totalflavonoids;Ultrasonicextraction　　木蝴蝶为紫葳科木蝴蝶属植物木蝴蝶Oroxylumindicum(L.)Vent的成熟种子[1]。木蝴蝶化学成分以黄酮及其苷类为主，许多成分在黄芩中都已经被发现过[2,3]。该植物为一常用中药，有清肺利咽、止咳、舒肝和胃以及生肌之功能，主治以咳嗽为主症的上呼吸道感染、急性支气管炎、急性喉炎(无喉梗阻)、慢性咽炎、百日咳、肺炎后期等[4]。　目前尚

4、未见有关木蝴蝶总黄酮提取工艺的研究报道，而用超声波法提取黄酮，是目前比较新的方法。其原理是利用超声波可使液体中产生“空穴作用”，破坏植物细胞和细胞膜结构，加速溶剂进入细胞，超声作用强化了胞内物质的释放、扩散和溶解，使其中的有效成分快速转入溶剂，使细胞内外出现浓度差，促使化学成分由高浓度溶液向低浓度溶液扩散。因此,超声波法大大加速了提取时间，提高了有效成分的提出率和原料的利用率[5，10]。我们研究室在植物有效成分和提取工艺方面进行了系列的研究[6],在此基础上，本文研究了超声波辅助提取木蝴蝶总黄酮的

5、工艺，并通过正交实验进行考察，以期为工业化生产提供参考依据。　　1仪器与材料　　1.1仪器UV-2102PC型紫外可见分光光度计，尤尼柯(上海)仪器有限公司;KQ-300VDE型三频数控超声波清洗器,昆山市超声仪器有限公司;RE-52A旋转蒸发器,上海亚荣生化仪器厂;SHZ-D(Ⅲ)循环水式真空泵，巩义市予华仪器有限责任公司;AR1140型电子分析天平，梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司。　　1.2材料与试剂木蝴蝶药材购自河南省药材公司，经刘福勤高级工程师鉴定为紫葳科植物木蝴蝶的种子;黄芩苷对照品(

6、含量≥98%)：购自成都曼思特生物科技有限公司;其它试剂均为分析纯。　　2方法与结果　　2.1木蝴蝶总黄酮含量的测定[7]　　2.1.1标准溶液的配制和标准曲线的制作精密称取已经在60℃减压干燥至恒重的黄芩苷标准样品17.1mg置100ml容量瓶中，用70%乙醇溶液定容至刻度，摇匀，即得黄芩苷对照品溶液(浓度：0.171mg/ml)，再精密吸取黄芩苷标准品溶液0.5，1.0，1.5，2.0，2.5，3.0ml，分别置于50ml容量瓶中，加70%乙醇定容至刻度，摇匀，以70%乙醇为空白，分别在最大吸收

7、波长278nm处测定其吸光度。以吸光度A为横坐标，浓度C为纵坐标绘制吸光度-浓度标准曲线，采用二元线性回归方法求出回归方程为：C=15.914A+0.1447，R2=0.9996。　　2.1.2样品中总黄酮含量的测定[8]精密称取木蝴蝶粗粉3.0g，置于150ml圆底烧瓶中，加入一定量提取溶剂，提取一定时间后真空抽滤，滤液经石油醚萃取3次后减压蒸馏回收溶剂至近干，加入70ml70%乙醇超声溶解，移入100ml容量瓶中，冷却至室温后用70%乙醇定容至刻度摇匀。取此样品液1.0ml置于50ml容量瓶中，

8、加入70%乙醇定容至刻度摇匀，取此稀释液3.0ml于50ml容量瓶中加入70%乙醇定容至刻度摇匀，以70%乙醇作参比液，在278nm处测定吸光度，根据标准曲线回归方程计算样品溶液的总黄酮浓度。样品中总黄酮得率按公式①计算：Y(%)=C×A×BD×10-6×100%①式中：Y―木蝴蝶总黄酮得率;A―稀释倍数;B―测定时定容量(ml);C―线性计算出的浓度(μg/ml);D―称取药材量(g)。　　2.2提取溶剂的选择精密称取上述木蝴蝶粉3.0g，8份，置150ml圆底烧瓶