广山楂总黄酮超声提取工艺条件研究.pdf

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1、·68·JournalofGuangxiUniversityofChineseMedicine2014。Vo1．17No．1广山楂总黄酮超声提取工艺条件研究覃学谦，陈洪涛，刘源焕，蔡丹昭(1．广西中医药大学第一附属医院，广西南宁530023；2．广西中医药大学制药厂，广西南宁530023；3．广西医科大学，广西南宁530021)摘要：[目的]探索超声提取广山楂总黄酮的最佳工艺条件。[方法]采用正交试验设计方法，以广山楂总黄酮的含量为指标进行考察，优化超声提取广山楂总黄酮的工艺条件。[结果]广山楂总黄酮超声提取效

2、果的影响因素依次为：提取溶剂体积分数>溶剂用量娘取次数>超声提取时间，经优化的广山楂总黄酮提取工艺为：加入16倍量7O％乙醇超声提取3次，每次提取时间40rain。[结论]超声提取稳定性好，效率高，采用筛选出的最佳工艺提取的广山楂总黄酮含量可迭3．49％。关键词：广山楂；总黄酮；超声提取；正交试验设计中图分类号：R284．2文献标识码：A文章编号：2o954J4l(2014)01-0068-03山楂(CrataeguspinnatifideBge)能活血化瘀和化积消2方法与结果食，I临床上可用于肉食积滞、胃脘胀

3、满、泻痢腹痛、产后瘀阻、瘀血经闭、疝气疼痛、心腹刺痛、高血脂症等症。常用山楂为2．1总黄酮的提取将广山楂烘干粉碎，过4O目筛，取广山蔷薇科山楂属植物山楂(GrataeguspinnatifdaBunge)或山里楂粉适量，精密称定为5．00g，置250ml锥形瓶，以适量乙醇红(GrataeguspinnatifdaBunge,n4orN．E．Dr)的干燥成为溶剂，超声提取，滤液减压回收溶剂后，定容至5Olnl为待熟果实⋯1。研究发现山楂中主要成分为黄酮类、有机酸类等。测液。近年来，黄酮类化合物对心脑血管疾病和免疫

4、调节的药理作2．2标准曲线的绘制参照文献[5]，精密称取干燥芦丁对用以及抗病毒、抗肿瘤、镇痛、抗氧化等作用成为研究热点[2_3j。照品加mg，置100ml容量瓶，加适量60％乙醇溶解后定容，广山楂为蔷薇科苹果属植物台湾林檎[Malusdoumeri(Bois)为标准对照液(含无水芦丁0．20WE)。分别精密移取标准对ehev．]，别名尖嘴林檎、大果山楂，在广西作山楂习用品已有照液0，1．5，2．5，3．5，4．5，5．5ml置25仃d容量瓶，分别标记为八十多年历史，主产于广西贺州、桂林、柳州、百色等地[4]。1

5、，2，3，4，5，6号瓶，各瓶依次加入0．75ml50g／L亚硝酸钠，目前对广山楂的药理药效学研究报道较少，为扩大广山楂资摇匀后静置6min；~I入0．75ml100s／L硝酸铝溶液，摇匀后源利用，进一步研究广山楂的药理药效，本课题组采用正交试静置6min；加入10rnl40以氢氧化钠溶液，60％乙醇定容，验设计的方法，以总黄酮含量作为指标，考察了超声提取广山摇匀后静置15rain。以1号瓶溶液为对照调零，取3号瓶溶液楂总黄酮的影响因素，并优化其提取工艺。行全波长扫描，确定510nm处有最大吸收，因此选择测定波

6、长为5101111"1，于此处测定各瓶溶液的吸光度值。以浓度(c)为1仪器与材料横坐标，吸光度(A)为纵坐标，进行线性回归，得回归方程：A=1．1仪器AL204型电子天平(METH~RTOLEDO)；UV一9．7906×C一0．0036(r=0．9995)。2500型分光光度计(Et本岛津)；ZFQ85A型旋转蒸发仪(上海2．3样品含量测定取1rrd待测液(见2．1项)置25ml容医械专机厂)；sHBⅢ型循环水式真空泵(郑州长城科工贸有量瓶，按2．2项下方法“各瓶依次加入0．75ml50g／L亚硝酸限公司)；H

7、WS一20型恒温水浴箱(江苏太仓市实验设备厂)。钠溶液⋯⋯”起操作，于510am处测定吸光度值，据回归方1．2试剂广山楂[购自广西壮族自治区药材站，经广西中程计算出总黄酮量，并计算广山楂总黄酮含量。总黄酮含医药大学韦松基教授鉴定为台湾林檎Malusdoumeri(Bois)量(％)=(总黄酮量／干药材量)x100％chev．的果实]；芦丁标准品(中国药品生物制品检定所)；亚2．4单因素实验考虑到乙醇浸出率较高、渗透性强、选择硝酸钠、95％乙醇、氢氧化钠、硝酸铝等皆为市售分析纯。性好的优点，本试验以乙醇溶液为提取

8、溶剂，考察了提取溶剂体积分数、溶剂使用量、提取次数及超声提取时间等因素对广收稿日期：2014—02—18基金项目：国家自然科学基金(8l36o688)；广西自然科学基金(2012GXNSFAA239008)；广西卫生厅中医药民族医药自筹经费课题(gzzc1203)；广西教育厅广西高等学校科研项目(201204LX195)作者简介：覃学谦，副主任药师；研究方向：中成药开发及中药临床药学研