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时间:2018-11-17
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1、榕树叶总黄酮超声提取工艺条件的研究论文陈洪涛,蔡丹昭,林立波【摘要】目的为充分利用榕树叶资源,研究超声提取榕树叶总黄酮的工艺条件。方法以总黄酮含量为考察指标,采用正交设计的方法研究超声波辅助提取榕树叶总黄酮的工艺条件。结果影响榕树叶总黄酮超声提取效果的主次因素为:乙醇浓度溶剂量提取次数超声时间,榕树叶总黄酮最佳提取工艺为16倍量70%乙醇超声提取3次,40min/次。结论优化的提取方法效率高,稳定性好.freelleavesofFicusmicroearpaL.MethodsTheextractionconditionsoftot
2、alflavonebyultrasoniceasuringthecontentofthetotalflavoneextract.ResultsThefactorsesandtimesumprocessoftheextractiontechnologyentandorthogonaldesignesextractionandfortyminuteseachtime.ConclusionTheoptimizedmethodisstableandefficient,therateoftotalflavoneextractedisupto
3、2.42%.KeyicrocarpaL.f.的叶,为广西壮族民间常用药,有清热、解表、化湿、活血散瘀的功效,常用于治疗流行性感冒、疟疾、急性肠炎、跌打损伤等疾病。榕树叶中主要含黄酮苷、香豆精等化学成分[1]。近年来对黄酮类化合物的药理作用有较多研究,发现其具有抗心脑血管病、抗氧化、镇痛、抗病毒、抗肿瘤、免疫调节等作用[2,3]。研究表明可用超声波提取榕树叶总黄酮[4],但未见对其提取条件优化的研究。为进一步研究榕树叶总黄酮的功效,充分利用榕树叶资源,本实验以总黄酮含量为考察指标,采用正交实验的方法对超声波辅助提取榕树叶总黄酮的工艺
4、条件进行了研究。1仪器与材料1.1仪器SG3300H超声波清洗器(上海冠特超声仪器有限公司);UV-2500分光光度计(日本岛津);SHBⅢ循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司);ZFQ85A旋转蒸发仪(上海医械专机厂)。1.2试剂芦丁标准品(中国药品生物制品检定所);榕树叶(采自广西药用植物园);95%乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠等皆为分析纯。2方法与结果2.1榕树叶总黄酮的提取取新鲜榕树叶,烘干,粉碎,准确称取榕树叶粉5g,置于250ml锥形瓶中,按要求加入一定量的提取剂,超声波提取一定时间,抽滤,减压回收溶剂,定容
5、于50ml容量瓶中,作为待测液。2.2标准曲线绘制精密称取干燥芦丁对照品20mg,置100ml容量瓶中,60%乙醇溶解,定容,得标准对照液(含无水芦丁0.2000g/L)。分别精密移取芦丁对照液0,1.5,2.5,3.5,4.5,5.5ml置25ml容量瓶中,.freell,摇匀,静置6min;再加100g/L硝酸铝溶液0.75ml,摇匀,静置6min;再加40g/L氢氧化钠溶液10ml,60%乙醇稀释至刻度,摇匀,静置15min,以第1瓶溶液为空白调零,取第3瓶溶液进行全波长扫描,测得510nm处有最大吸收,因此于510nm测各
6、瓶溶液吸光度;以浓度(C)与吸光度(A)进行线性回归,得方程为:A=9.9754C-0.0035,r=0.9989。2.3样品含量测定取“2.1”项中待测液1ml于25ml容量瓶中,从分别加入50g/L亚硝酸钠溶液起同“2.2”项下操作,510nm处测定吸光度,根据回归方程计算各样品榕树叶总黄酮含量。总黄酮含量(%)=总黄酮量/干药材量×100%2.4单因素实验由于乙醇作为提取溶剂具有选择性好,渗透性强,浸出率较高的优点,因此本实验选择一定浓度的乙醇溶液作为提取剂,并分别考察了溶剂浓度、溶剂用量、浸泡时间、超声波萃取时间及萃取次数
7、等因素对提取率的影响。2.4.1溶剂浸泡时间对提取率的影响各取5g样品,分别加入60%乙醇50ml,浸泡0.5,1,1.5,2,2.5,3,3.5h,超声波提取30min,抽滤,定容至50ml,按“2.3”项下方法制备样品,测510nm吸光度值,由回归方程计算得各样品总黄酮含量。结果见表1,图1。从结果可见,样品浸泡1h以上已达到浸泡完全,提取所得总黄酮含量基本一致。表1溶剂浸泡时间与总黄酮含量的关系(略)2.4.2乙醇浓度对提取率的影响各取5g样品,分别加入50ml不同体积分数的乙醇(30%,40%,50%,60%,70%,80
8、%,95%),浸泡1h,超声波提取30min,抽滤,定容至50ml,测510nm吸光度值,计算总黄酮含量。结果见表2及图2。从结果可见,60%~80%体积分数的乙醇对榕树叶总黄酮提取率均较高,其中以70%乙醇最佳。表2乙醇浓度与总黄酮含量的关系(略
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