微波辅助法提取银杏叶总黄酮的研究.pdf

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1、2014年第1期九江学院学报(自然科学版)(总第104期)No．1，2014Journalofji~iangUnive~ity(n~urMsciencesEdition)(SumNo．104)微波辅助法提取银杏叶总黄酮的研究毛龙火王丽丽熊英(1南昌大学第一附属医院传染科江西南昌330031；2九江学院基础医学院江西九江332000)摘要：目的研究微波辅助乙醇浸润法对银杏叶总黄酮的提取工艺，寻找最佳提取条件，为银杏叶总黄酮的制备提供实验依据。方法以芦丁标准品为对照物、以紫外分光光度法测定银杏叶总黄酮的含量作为考察指标，考察乙醇浓度、提取时间和料液

2、比三个因素对银杏叶总黄酮提取量的影响，并在单因素基础上进行正交实验，获得最佳工艺。结果银杏叶总黄酮的最佳提取工艺为：乙醇浓度90％、提取时间3min、料液比l：25，此时黄酮得率为1．52％。关键词：黄酮，提取，微波辅助法中图分类号：TQ461文献标识码：A文章编号：1674—9545(2014)01—0078一(04)银杏(Ginkgobiloba1)系银杏科植物，具有碳超临界提取法、酶解法、超声波提取法等1]。欣赏、经济、药用等多种价值。近年来，银杏叶有机溶剂提取排污量大；水或热水提取法效率低；的药用价值备受关注，引得广大学者去研究探讨。氧

3、化碳超I临界提取法、酶解法成本较高；微波已发现的银杏叶化学提取物有上百种，其中主要提取法设备简单，提取效率高，是一个比较好的有黄酮类、萜类、酚类、生物碱等，而近年来的提取方法。因此，本实验用微波辅助有机溶剂研究表明：黄酮类物质是银杏叶的主要有效成分。法提取银杏叶中总黄酮，以了解微波辅助下各种黄酮类化合物的结构特点是具有C6一c3一c6的因素对银杏叶总黄酮提取效率的影响，最后经聚基本骨架，根据中间三碳链的氧化程度、B环酰胺纯化，为进一步研究银杏叶的后期应用奠定(苯基)连接位置(2一或3一位)以及三碳链是基础。否呈环状等特点，分为许多类型：黄酮、黄

4、酮醇、1材料与方法二氢黄酮、二氢黄酮醇、异黄酮、二氢异黄酮、1实验材料查尔酮等化合物¨。现已证实，银杏叶中含有的1．1．1实验药物实验所用银杏叶购自九江天天好黄酮类化合物具有优异的抗氧化活性、抗肿瘤活大药房。性、防治心血管疾病和增强免疫力等作用。正是1．1．2标准对照品芦丁标准品(中国生物制品其上述众多的生物活性引起了人们的广泛重视，检定所，批号100080—200707)配制成0．25mg／对该类化合物的研究已成为国内外医药界研究的mL的芦丁标准液。热门课题，是一类具有广泛开发前景的天然药1．2试验方法与结果物⋯。1．2．1芦丁标准品溶液的制

5、备精确称取干燥至恒目前提取黄酮化合物的主要方法有有机溶剂重的芦丁对照品l0．0mg于50mL容量瓶中，用适提取法、水或热水提取法、微波提取法、二氧化量70％乙醇溶解、蒸馏水定容。作为浓度为基金项目：江西省教育厅青年研究基金项目(编号GJJ10265)成果之一。收稿日期：2013—10—9通讯作者：毛龙火，liumuyang217@163．com。OOO第1期毛龙火，等：微波辅助法提取银杏叶总黄酮的研究·79·8760．2mg／mL的芦丁标准品溶液备用。于紫外荧光灯下观察，显黄色斑点。②浓氨水溶1．2．2银杏叶总黄酮样品溶液制备先把银杏叶粉液：将

6、样品点在纸上，干燥后，将滤纸在浓氨水碎、干燥，称取银杏叶粉末1g，按比例加入一定瓶上熏，立即置于荧光下呈现极明显的黄色荧光浓度乙醇作溶剂，置于微波设备中提取浓缩，提斑点。取液过滤，加30％的乙醇溶解定容于50mL，摇匀1．2．6银杏叶总黄酮的纯化静置备用。(1)聚酰胺的预处理：取聚酰胺适量用4倍1．2．3测定吸光度波长的选择分别取适量的芦丁体积量95％乙醇浸泡48h，用超纯水洗至中性；标准品溶液和制备好的银杏叶总黄酮溶液，加入然后用4倍体积量的0．5％NaOH浸泡24h后再用3O％的乙醇至20mL，加入5％的NaNOlmL，摇水洗至中性；最后再

7、用10％乙酸浸泡24h，用水匀静置6min，加10％A1(NO)3lmL·，摇匀静置洗至中性。6min，再加人10％的NaOH10mL，并加蒸馏水定(2)总黄酮的纯化：称取已处理好的聚酰胺容至50mL，摇匀静置15min后使用双光束紫外可200g装入层析柱中，将银杏叶提取液约400mL以见分光光度计测最大吸光度，测得上述两种溶液2～3mlMmin的流速上柱，过柱完后用3倍聚酰胺在5l1．2nm处有最大吸收波长。因此，本研究中体积量(3～4BV)的超纯水以3—4mlMmin的速将511．2nm作为最大吸收波长。度洗柱至出水无色，再用4BV70％的

8、乙醇以2～1．2．4标准曲线的制备分别取已制备好的芦丁3mL／min的洗脱速度洗脱至无色透明，收集70％标准品溶液0mL、1．0mL、2．0mL、3．