微波辅助法提取穿破石总黄酮工艺优化

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1、微波辅助法提取穿破石总黄酮工艺优化　　摘要：以乙醇溶液为提取溶剂，采用微波辅助法从穿破石（RadixCudramiae）中提取总黄酮，在单因素试验的基础上采用正交试验考察乙醇溶液体积分数、料液比、微波功率及微波处理时间对总黄酮提取率的影响。结果表明，4个因素对总黄酮提取率的影响由大到小依次为微波功率、乙醇溶液体积分数、微波处理时间、料液比，优化的微波辅助法提取穿破石中总黄酮的最佳条件为乙醇溶液的体积分数60%、料液比m穿破石∶V乙醇=1∶50（g/mL）、微波功率560W、微波处理时间90s，此条件下穿破石中总黄酮提取率为1.96%。关

2、键词：穿破石（RadixCudramiae）；总黄酮；微波辅助提取中图分类号：R284.2文献标识码：A文章编号：0439-8114（2013）13-3134-03穿破石（RadixCudramiae）为桑科植物构棘（Cudraniacohinchinensis）或柘树（C.7tricuspidata）的根，具有祛风利湿、活血通经功效，能治疗风湿关节疼痛、跌打损伤、黄疸及疔疮痈肿等病症，是民间常用本草中药[1-4]。近年来，微波辅助提取法被广泛应用于植物有效成分的提取，该法具有设备简单、提取效率高、安全环保等优点[5]。本研究以穿破石干

3、粉为原料，采用微波辅助法提取其中的总黄酮，考察乙醇溶液体积分数、料液比、微波功率及微波处理时间对穿破石总黄酮提取率的影响，优化提取工艺条件，为更好地开发和利用穿破石资源提供理论依据[6，7]。1材料与方法1.1材料与仪器穿破石采自中越边境广西壮族自治区崇左市龙州县彬桥乡小青山。清洗干净，置于60℃烘箱中烘干，粉碎后过60目筛，贮藏于干燥箱中备用。芦丁标准品为美国Bioszune公司产品，生化试剂，纯度≥98%；亚硝酸钠（NaNO2）、硝酸铝（Al（NO3）3）、氢氧化钠（NaOH）、乙醇等均为分析纯。主要仪器设备有UV-1601型紫外可

4、见分光光度计（北京瑞利分析仪器公司）、101-2型电热恒温鼓风干燥箱（上海跃进医疗器械厂）、FW800型高速万能粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公司）、AR124CN型电子天平（奥豪斯仪器（上海）有限公司）、KJ23B-AN型美的微波炉（广东美的微波炉制造有限公司）、SHB-Ⅲ型循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司）、DKS-12型不锈钢新型电热恒温水浴锅（杭州蓝天化验仪器厂）。1.2试验方法1.2.1芦丁标准曲线的绘制精确称取经102℃干燥至恒重的芦丁标准品25.07mg，加80%（体积分数，下同）的乙醇溶液溶解，并定容于100mL

5、容量瓶中，得到标准液。精确吸取0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0和12.0mL标准液分别于50mL容量瓶中，加50mg/mL的NaNO21.5mL，混匀，放置6min，加0.1g/mL的Al（NO3）31.5mL，混匀，放置6min，加40mg/mL的NaOH20mL，再加80%的乙醇溶液至刻度，摇匀，放置15min，以80%的乙醇溶液为空白对照，在510nm波长处测定溶液的吸光度，得到芦丁浓度（C//mg/mL）对吸光度（A）的标准曲线（图1），回归方程为A=11.533C+0.008，r=0.9998。1.2.2穿破石总黄

6、酮的提取称取1g穿破石干粉，加入一定体积分数的乙醇溶液作提取剂，在60℃恒温水浴1h后进行微波处理，提取液真空抽滤并收集滤液于100mL容量瓶中定容，然后吸取1.0mL滤液于50mL容量瓶中，按“1.2.1”方法测定总黄酮浓度，计算穿破石总黄酮提取率。1.2.3单因素试验设计单因素试验分别考察乙醇溶液体积分数、料液比（m穿破石∶V乙醇，g/mL，下同）、微波功率、微波处理时间4个因素对穿破石总黄酮提取率的影响。①乙醇溶液体积分数。取5份各1g穿破石干粉，加入40mL体积分数分别为50%、55%、60%、65%、70%的乙醇溶液，60℃恒

7、温水浴1h后以400W的微波功率处理60s，计算总黄酮提取率。②料液比。取5份各1g穿破石干粉，分别加入30、40、50、60、70mL体积分数60%的乙醇溶液，607℃恒温水浴1h后以400W的微波功率处理60s，计算总黄酮提取率。③微波功率。取5份各1g穿破石干粉，加入60mL体积分数60%的乙醇溶液，60℃恒温水浴1h后分别以80、240、400、560、800W的微波功率处理60s，计算总黄酮提取率。④微波处理时间。取5份各1g穿破石干粉，加入60mL体积分数60%的乙醇溶液，60℃恒温水浴1h后以400W的微波功率分别处理60

8、、70、80、90、100s，计算总黄酮提取率。1.2.4正交试验设计正交试验进一步考察乙醇溶液体积分数、料液比、微波功率、微波处理时间4个因素对穿破石总黄酮提取率的影响。正交试验因素与水平见表1。2结果与