葡萄酒泥酵母超氧化物歧化酶分离提取工艺条件优化.pdf

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1、食品-II鲥妓三艺搜求ScienceandTechnologyofFoodIndustry葡萄酒泥酵母超氧化物歧化酶分离提取工艺条件优化杜娜’,杨学山,韩舜愈’,祝霞’,付文力,王婧,盛文军,张波(1.甘肃农业大学食品科学与工程学院,甘肃兰州730070;2.甘肃农业大学生命科学技术学院,甘肃兰州730070)摘要:以葡萄酒泥酵母试材,采用甲苯破壁法分离纯化超氧化物歧化酶(SOD),选择甲苯用量、作用时间、作用温度以及缓冲液pH进行单因素实验,通过L(3)正交实验优化工艺参数。结果表明:在甲苯用量0.8mL/g,作用时间25min,作用温度50℃,磷酸缓冲液pH8.0的最优条件下,分离

2、纯化的SOD平均比活力为178.73U/rag。此方法操作简单,成本低,适合工厂化生产。关键词:超氧化物歧化酶,甲苯,葡萄酒泥酵母,比活力ProcessoptimizationforextractingsuperoxidedismutasefrOmwastewineyeastDUNa,YANGXue—shan一,HANShun—yu,ZHUXia,FUWen—li,WANGJing,SHENGWen—jun,ZHANGBo(1.CollegeofFoodScienceandEngineering,GansuAgricuhuralUniversity,Lanzhou730070,Chin

3、a;2.CollegeofLifeScience&Technology,GansuAgriculturalUniversity,Lanzhou730070,China)Abstract:Wastewineyeastastheresearchobject,thesuperoxidedismutase(SOD)wasextractedfromitbytoluenemethod.Fourextractionparametersincludingamountoftoluene.react卅T1e,reacttemperatureandpHusedforsinglefactortest,ando

4、ptimizationofprocessparametersthroughL9(3)orthogonaltest.Theresultsshowedthattheoptimalamountoftoluenewere0.8mL/g,reacttimewas25min,reacttemperaturewas50oC,pHwas8.0,undertheseconditions,thespecificactivityofSODwas178.73U/mg.Theprocesswassimpleandinexpensiveandcoudebeappliedtoindustrializedproduc

5、tion.Keywords:superoxidedismutase(SOD);toluene;wineyeast;specificactivity中图分类号:TS209文献标识码:B文章编号:1002—0306(2013)15—0242-04超氧化物歧化酶(Superoxidedismutase,SOD,萄酒年产量已达123.2万t,加工各个阶段产生酒泥EC1,15,1,1)是广泛存在于生物体内的一种胞内金量约占总加工量的4%~5%。但目前国内葡萄酒属酶,可催化超氧阴离子(superoxideanions,0·)与泥酵母尚未得到充分利用,大多数企业将其作为饲H发生歧化反应,解除O·对机

6、体的毒害⋯。因此,料、肥料,附加值很低,有一些甚至作为垃圾倾倒,不SOD制剂已被广泛应用于医疗、食品及化妆品领仅污染环境,而且浪费了宝贵的生物资源。因此,域。自1969年Mccord从牛血中发现SOD以来,利用葡萄酒泥酵母生产SOD,有较大的经济意义和人们已从猪、牛、马等动物红细胞、肌肉、肝脏组织以社会意义。酵母具有较为坚固的细胞壁,破壁效果及植物和微生物中分离化出SOD,其中利用微生物直接影响SOD的分离提取。苏昕等研究了发酵培生产SOD具有成本低、周期短、适用于规模化生产和养Y12酵母菌分离制备酵母SOD,并对其部分酶学所得产品安全性高等特点。研究证实,真核微生性质进行了深入的探讨

7、;廖湘萍等采用异丙醇破物的SOD含量一般高于原核微生物,其中酵母菌含壁法对啤酒酒泥酵母生产SOD进行了研究;王岁楼有丰富的线粒体,呼吸系统最完整,因而SOD含量高等采用甲苯破壁法从活性干酵母中直接提取于其它丝状真菌,可以作为SOD的主要生产菌SOD,但利用葡萄酒泥酵母纯化SOD尚未见报道。种-一。葡萄酒泥是葡萄酒酿造过程中的主要副产甲苯可溶解酵母细胞膜磷脂层,改变细胞膜结构,提物,含有大量的酵母细胞。据统计,2011年我国葡高细胞膜的通透性,从

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