司来吉兰对帕金森病模型大鼠结肠酪氨酸羟化酶及Bax 表达的影响.pdf

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1、神经损伤与功能重建·2015年5月·第10卷·第3期245·基础研究·司来吉兰对帕金森病模型大鼠结肠酪氨酸羟化酶及Bax表达的影响12毕树立,高海英摘要目的:观察司来吉兰对帕金森病(PD)模型大鼠结肠功能障碍及结肠酪氨酸羟化酶(TH)及Bax表达的作者单位影响。方法:健康雄性SD大鼠60只随机分为对照组、PD组及治疗组,各20只,每组均设4d及8d共2个时1.河北省唐山市开间点。采用颈背部皮下注射鱼藤酮制备PD模型大鼠,模型制备成功后,治疗组每日灌胃司来吉兰0.5mg/kg,平医院急诊科直至试验时间点。对照组及PD组每只每日均连续灌胃等体积生理盐水至试验时

2、间点。分别于治疗后4d、8河北唐山063021d测定1h粪便排出量及含水量,应用免疫组化法S-P法及Westernblotting检测TH及Bax在大鼠结肠组织2.河北省唐山市丰中的表达情况。结果:PD组和治疗组大鼠1h粪便排出量及含水量低于对照组(P<0.05);治疗组大鼠1h粪南区医院便排出量及含水量高于PD组(P<0.05);治疗8d后治疗组大鼠1h粪便排出量及含水量高于同组治疗4d河北唐山063300时(P<0.05)。PD组和治疗组各时间点上TH光密度值(IOD)及TH蛋白表达低于对照组(P<0.05),BaxIOD基金项目及Bax蛋白表达高于对

3、照组(P<0.05);治疗组各时间点THIOD及TH蛋白表达高于PD组(P<0.05),Bax唐山市科学技术研IOD及Bax蛋白表达低于PD组(P<0.05);治疗8d后治疗组THIOD及TH蛋白表达高于同组治疗4d究与发展指导计划时,BaxIOD及Bax蛋白表达低于同组治疗4d时(均P<0.05)。结论:PD大鼠结肠组织中的TH表达降低,(No.13130292a)而Bax表达增加。司来吉兰可改善PD大鼠结肠功能障碍,其作用机制可能与其减轻PD模型大鼠结肠多巴胺能神经元的损伤和抑制Bax表达有关。收稿日期关键词司来吉兰;酪氨酸羟化酶;Bax;帕金森病;结

4、肠2015-03-10中图分类号R741;R741.02;R741.05;R742文献标识码ADOI10.3870/sjsscj.2015.03.021通讯作者毕树立帕金森病(Parkinson'sdisease,PD)是好发于中、组),各组再随机分为模型制作成功后4d和8d共2bishuli2014@163.老年人的慢性神经系统退行性变性疾病。临床上除个时间点,每时间点10只。采用颈背部皮下注射鱼com了运动迟缓、肌强直、静止性震颤和姿势平衡障碍为藤酮制备PD模型[5]:鱼藤酮应用葵花油溶解配制成主要的运动症状表现之外[1,2],还常出现精神障碍,自2m

5、g/mL鱼藤酮葵花油乳液,充分震荡混匀后避光主神经功能紊乱,胃肠道功能紊乱等非运动性症状,保存。PD组和治疗组大鼠用1mL注射器于颈背部且发生率较高[3,4]。本研究以鱼藤酮制作的PD大鼠皮下注射鱼藤酮葵花油乳液(2mg/kg体重),以出现模型为对象,观察司来吉兰对PD大鼠模型结肠中行为学改变作为判定模型成功的指标[6]。将大鼠行为酪氨酸羟化酶(tyrosinehydroxylase,TH)及Bax表达变化分6个等级记分[6]:1分,大鼠出现拒捕行为减的影响,探讨司来吉兰在PD患者消化道功能紊乱弱、竖毛、毛色变黄变脏、弓背、主动活动减少;2分,中的作用及可

6、能机制。有1分的表现,且主动活动减少明显、动作迟缓,并有震颤,或有步态不稳;4分,有2分的表现,且步态1材料与方法不稳,或不能直线行走、或行步时向一侧旋转;6分,1.1材料向单侧斜卧,单侧前肢和/或后肢瘫痪,行走困难、进1.1.1实验动物健康雄性SD大鼠60只,体质量食困难;8分,单侧,前肢和/或后肢完全瘫痪,四肢拘180~250g,由北京华阜康生物科技股份有限公司挛,体重大幅度减轻,不能进食;10分,濒死状态或死提供。亡。选择2~6分作为实验大鼠。模型制备成功后,治1.1.2主要试剂与仪器盐酸司来吉兰购于Orion疗组:司来吉兰0.5mg/kg每日灌胃。

7、对照组及PDCorporation公司;鱼藤酮购于北京博奥森生物工程组每只每日均连续灌胃等体积生理盐水,直至试验有限公司;葵花油购于唐山沃尔玛超市;兔抗大鼠时间点。TH抗体和兔抗大鼠Bax抗体购于北京博奥森生物1.2.21h粪便排出量及含水量测定参照Li等[7]报工程有限公司;SP免疫组化试剂盒、DAB显色液购道的方法,造模成功后4d和8d,每组分别取10只自北京中杉生物有限公司;奥林巴斯BX63全自动大鼠,每只大鼠被单独放在1个底部铺有滤纸的干显微镜扫描系统购于OLYMPUS公司。净笼内。大鼠排出粪便后立即收集在1个密闭管中,1.2方法称重后得到粪便排出

8、量即湿重;;65℃干燥12h后再1.2.1分组及造模大鼠随机分为正

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