琥珀酰化对水酶法提取大豆蛋白的影响-论文.pdf

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1、2012年2月中国粮油学报V0l_27．No．2第27卷第2期JournaloftheChineseCerealsandOilsAssociationFeb．2012琥珀酰化对水酶法提取大豆蛋白的影响刘雯江连洲李杨黄莉(东北农业大学食品学院，哈尔滨150030)(国家大豆工程技术研究中心，哈尔滨150030)摘要大豆蛋白是大豆水酶法的主要副产物，提高大豆蛋白提取率对于更好地实现大豆水酶法副产物的综合利用意义重大。通过将琥珀酰化与水酶法相结合，研究了加酶量、液料比、琥珀酸酐添加量、酶解时间和改性时间对总蛋白提

2、取率的影响，并利用响应面分析法优化出最佳改性工艺参数：加酶量为2．24％，液料比为5．25：1，琥珀酸酐添加量为5．13％，酶解时间为3．21h，改性时间为1．64h。在此条件下的总蛋白提取率为93．Ol％，多肽提取率为66．O2％，与改性前相比分别提高了4．37％和23．46％。关键词琥珀酰化改性大豆蛋白水酶法中图分类号：TS224．8文献标识码：A文章编号：1003—0174(2012)02—0014—06传统的植物油制取方法虽然能提取95％以上的性时间对总蛋白提取率的影响，并利用响应面分析油脂，但是提

3、油后油料蛋白会严重变性，很难再作为优化出最佳改性工艺参数，为提高大豆蛋白提取率，食品或饲料再使用J。水酶法是一种新型的非有机更好地实现大豆水酶法副产物的综合利用，以及开溶剂提油技术，受到国内外油脂从业者和研究机构发出功能性更强的副产物产品提供一定的理论的广泛关注。它显著的优势是作用条件温和，能耗参考。低，能避免有机溶剂的使用，是“绿色”提油工艺，能同时回收油料中的蛋白质、可溶性糖类、功能性因子1材料与方法等物质J。水酶法回收的蛋白含有部分大豆多肽。1．1材料与试剂研究发现大豆多肽具有多种生理功能，例如，大豆

4、多琥珀酸酐：国药集团化学试剂有限公司；Protex一肽比大豆蛋白更易被消化吸收，抗原性更低，具有促6L碱性蛋白酶：美国杰能科酶制剂公司；大豆：黑龙江进体内脂肪代谢，肌红细胞的复原，降低胆固醇，抑农业科学院培植的垦农47；其他试剂为分析纯。制血压升高，增强免疫力和抗自由基损伤(延缓衰1．2试验仪器老)等功能。PHS一25型数显酸度计：杭州奥立龙仪器有限琥珀酰化是蛋白质化学改性的常用方法，是通公司；FA2004型电子天平：上海舜宇恒平科学仪器有过大豆蛋白质分子的亲核基团(如氨基、羟基)与琥限公司；XMTD一40

5、00型电热恒温水浴锅：北京市永珀酸酐的亲电子基团(如羰基)相互反应，再引入琥光明医疗仪器厂；SC一3614型低速离心机：安徽中科珀酸亲水基团，在催化剂的作用下继续引入长碳链中佳科学仪器有限公司；JJ一1精密增力电动搅拌亲油基团，使大豆蛋白成为具有双极性基团的高分机：金坛市双捷实验仪器厂；HYP一1020二十孔消子表面活性剂J。研究结果表明琥珀酰化能够明显化炉、KDN一04III型蛋白质测定仪：上海纤检仪器有改善蛋白的功能特性，高度酰化的蛋白质在碱性条限公司；剖分式双螺杆挤压机(干法)：东北农业大学件下溶解度

6、会增大，利用琥珀酰化后的蛋白进行酶工程学院农产品加工实验室自制。解能够显著地提高多肽提取率。1．3试验方法本试验将琥珀酰化与大豆水酶法相结合，研究1．3．1常规测定了加酶量、液料比、琥珀酸酐添加量、酶解时间和改粗蛋白的测定：依据GB5009．5_2OlO。基金项目：黑龙江省攻关项目(GA09B401—6)收稿日期：2011—05—16水分的测定：依据GB／T14489．1_2O08。作者简介：刘雯，女，1987年出生，硕士，粮食、油脂及植物蛋白1．3．2工艺流程：通讯作者：江连洲，男，1960年出生，教授，

7、博士生导师，粮食、油脂及植物蛋白工程大豆一膨化一粉碎(过4O目筛)预热(85℃第27卷第2期刘雯等琥珀酰化对水酶法提取大豆蛋白的影响1510min)一酶解(pH9．5，50℃)一琥珀酰化一灭酶4％，改性时问为2h，酶解时间分别取1、2、3、4、5h，(100℃，10rain)离心分离(4500r／min，20min)考察反应后总蛋白的提取率。一残渣一水洗一离心分离(4500r／min，20min)一残1．4．1．5改性时间对水酶法总蛋白提取率的影响渣加酶量2％，液料比为6-1，琥珀酸酐添加量为1．3．3挤压

8、膨化工艺参数¨4％，酶解时间为3h，改性时间分别取1、2、3、4、5h，模孔孔径20mm，物料含水率14．5％，螺杆转速考察反应后总蛋白的提取率。105r／min，套筒温度90℃。1．4．2响应面设计1．3．4琥珀酰化改性方法在单因素研究的基础上，选取加酶量、液料比、搅拌条件下在酶解液中分多次加入琥珀酸酐。琥珀酸酐添加量、酶解时问、改性时间5个因素为自反应过程中以1mol／LNaOH调节溶液pH在8．0～变量，以