固相萃取高效液相色谱法测定全血环孢素浓度-论文.pdf

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1、医药导报2014年1月第33卷第1期·31·固相萃取高效液相色谱法测定全血环孢素浓度宋新文，汪洋，刘圻，彭静，许琼(武汉市妇女儿童医疗保健中心，武汉430016)摘要目的建立一种简便的测定全血环孢素浓度的高效液相色谱法。方法以VenusilASBC为色谱柱，流动相为乙腈一水=70：30，柱温70℃，检测波长为210nm，进样量200；全血样品经10％尿素溶血处理离心后，取上清液直接上PRS—SPE柱，用等体积乙腈一四氢呋喃(80：20)作为洗脱剂，收集洗脱液直接进样测定。结果环孢素全血样品线性范围为30～3500ng·mL～，低、中、高3种不同浓度(78

2、．2，300．0，1213．0ng·mL)方法回收率分别为101．66％，104．06％，100．46％，日内、日间RSD均<5％。结论该方法准确性好，灵敏度高，样品处理简单，可满足儿科临床中环孢素全血浓度监测需要。关键词坏孢素；固相萃取；色谱法，高效液相中图分类号R979．5；R969文献标识码A文章编号1004—0781(2014)O1—0031—03DeterminationofCyelosporininWhOIeBloodbySolid-PhaseExtractionandHighPerformanceLiquidChromatographySO

3、NGXin·wen，WANGYang，LIUXin，PENGJing，XUQiong(WomenandChildrenHealthCareCenterWuhanCity，Wuhan430016，China)ABSTRACTObjectiveToestablishasimplehigh—performanceliquidchromatography(HPLC)methodtodeterminatecyelosporininwholeblood．MethodsTheHPLCwascarriedoutbyusingVenusilASBC1目column．ace

4、tonitrile／water(70：30)asamobilephase，settingcolumntemperatureat70℃，detectionwavelengthat210nm．Wholebloodsampleswereeentrifugatedaftertreatedwith10％ureaforhemolysis．TwohundredmicrolitersofthesupernatantwasdirectlyiniectedintothePRS—SPEcolumn．usingequalvolumeofacet0nitrile／tetrahvd

5、rofuran(8O：20)astheeluent．ResultsThemethodislinearat30to3500ng·mL～cuⅣerange．Therecoveriesatlow，mediumandhighconcentrations(78．2，300．0，1213．0ng·mL)were101．66％．104．06％and100．46％．respectively．Theintra—andinter—dayRSDwerelessthan5％．ConclusionThemethodisaccurate，sensitive，andthesample

6、iseasytohandle，fullymeetingtherequirementofpediatricclinicalpracticefordeterminationofcyclosporininwholeblood．KEYWORDSCyclosporin；Solidphaseextraction；Chromatography，highperformanceliquid环孢素是临床上常用的免疫抑制药，在成人主要度高、成本低廉、易于推广普及等优点，但文献报用于器官移植后抗免疫排斥，在儿科临床上多用于重道大多采用液液萃取法等多重步骤提取，操作比型再生障碍性

7、贫血和难治性肾病综合征的治疗，也可较复杂，难以适应临床常规监测的需要。为此笔者通用于系统性红斑狼疮、噬血细胞综合征等其他免疫性过固相萃取处理样品建立了HPLC法测定全血环孢疾病。但是环孢素毒副作用大，治疗窗较窄，药物吸收素，用于小儿再生障碍性贫血及激素耐药型肾病综合个体差异大，临床上往往需要通过监测其血药浓度来征(难治性肾病)患儿环孢素全血浓度的监测，取得了实行个体化用药，以减少其肝、肾毒性等不良反应和提满意效果，现报道如下。高治疗效果。因此，开发和建立一种能够快速、准确地1仪器与材料测定血液中环孢素浓度的检测技术以指导安全合理使1．1仪器Agilent

8、1260高效液相色谱仪：包括用环孢素就具有十分重要的临床价值。G1311C二元色