豆豉纤溶酶纳米脂质体的肠吸收效率研究-论文.pdf

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1、第14卷第6期中国食品学报Vol_14No．62014年6月JournalofChineseInstituteofFoodScienceandTechnologyJun．2014豆豉纤溶酶纳米脂质体的肠吸收效率研究张婵李小东王成涛(北京工商大学北京市食品添加剂工程技术研究中心食品质量安全北京实验室北京100048)摘要采用外翻肠囊法和大鼠在体单向灌注法，以肠吸收速率(K)和表观渗透系数(P聊)为指标，考察豆豉纤溶酶纳米脂质体的小肠吸收部位及效率。结果显示，由外翻肠囊法测得豆豉纤溶酶纳米脂质体的回肠段K和P黜分别为3．25x10IX

2、s和2．355~10cm／s，且吸收速率随着浓度的升高而降低，最终出现饱饮现象。由大鼠在体单向灌注法测得的和P岬分别为(1．49~0．22x10。。)g／s和(7．90~1．46)xi0ends。上述两种方法均表现出豆豉纤溶酶纳米脂质体在回肠的吸收效率为最高，这可能与回肠中大量存在Peyer’S淋巴结有关．而Peyer’S淋巴结中存在的M细胞可能导致饱饮现象关键词豆豉纤溶酶；纳米脂质体；外翻肠囊法；在体单向灌流法；肠吸收文章编号1009—7848(2014)06—0028—08心脑血管疾病严重危害着人们健康，已成为类药物或功能因子

3、，存在易被胃肠道酶的降解或人类死亡的第一“杀手”fl1。近年来国内外的研究表跨膜吸收率低等瓶颈问题，因此胃肠耐受性及吸明已从多种传统发酵食品，如日本Natto(纳豆)[2-3]收效率成为限制其口服给药的主要因素。如何提和Tofuyd4]，韩国豆酱(Chungkook-Jangsoysauce)[~．高其生物利用度，成为近年蛋白质类等大分子物中国豆豉、虾酱和豆腐乳[-7J等中分离筛选出特定质开发利用的热点之一。功能的产纤溶酶菌株。本课题组从山东传统发酵小肠是消化道的最长部分和主要吸收部位。食品——八宝豆豉中分离出l株高产豆豉纤溶酶研

4、究发现，大多数寡肽、蛋白质分子物质吸收主要(douchifibrinolyticenzymes)的枯草芽孢杆菌在小肠内完成．然而其在小肠内的吸收方式及效(Bacillussubtilis)DC12—33。豆豉纤溶酶是一类具率、吸收部位及机制、转运蛋白、代谢动力学等不有纤溶活性的丝氨酸蛋白酶．不仅能直接溶解血明确．甚至存在争议。对上述科学问题的深入研栓纤维蛋白．还能激活机体内无活性的纤溶酶原究．可以帮助人们了解寡肽、蛋白质的口服吸收机转化成活性纤溶酶．从而达到溶解血栓的作用。具制和生物利用度，并指导剂型设计、筛选及配方。有纤溶、抗凝

5、、溶栓等多种特性”，可用于开发具现在寡肽、蛋白质的口服制剂的开发，主要依赖于有预防和治疗心脑血管栓塞性疾病的保健食品和一些新技术，如纳米脂质体包埋技术、靶向定位给溶栓剂。药技术、缓释技术、分子修饰改性技术等，从而提口服是1种方便的给药方式．目前临床上已高其吸收效率和生物利用度。有一些口服的纤溶酶制剂或功能食品。如蚓激酶、目前研究药物的肠吸收方法主要有体外法纳豆激酶等，它们表现出较好的预防和治疗心脑(invitro，如外翻肠囊法和Caco一2细胞模型法血管栓塞性疾病的效果。由于口服寡肽或蛋白质等)、在体法(insitu，如在体单向肠

6、灌注法)和体内法(invivo)等。吸收速率常数()和肠膜表观渗收稿日期：2013—07—03透系数(P哪)是评价肠吸收的两个重要的动力学基金项目：教育部科学技术研究重点项目(211101)；北京参数，K表示吸收的快慢，表示在肠的通透率，市教委面上项目(KM201110011001)；北京市属值与其生物利用度具有良好的相关性【l2_”]。豆高等学校创新团队建设与教师职业发展计划项目(2013113)豉纤溶酶(分子质量约30ku)与蚓激酶(分子质量作者简介：张婵，女，1984年出生，博士，讲师26ku)、纳豆激酶(约30ku)等有类

7、似的分子质通讯作者：王成涛第14卷第6期豆豉纤溶酶纳米脂质体的肠吸收效率研究29量、生化性质及功能特征。本文将外翻肠囊法与大豆豉纤溶酶纳米脂质体溶液，平衡5min后开始鼠在体单向灌注法结合，以和为主要考察试验，每隔30min取样一次，样品于4cI=，5000r／指标。研究评价豆豉纤溶酶及其纳米脂质体的肠min离心10rain．测量样品中豆豉纤溶酶浓度，并吸收部位及效率．为豆豉纤溶酶口服制剂及功能计算吸收速率(致)和表观渗透系数()。食品的开发提供理论支持。以肠囊内豆豉纤溶酶在t时间内吸收量与时间t进行回归，得方程Qt=K+A，计算

8、豆豉纤溶酶1材料与方法的肠吸收速率为Ka(g，s)，肠膜表观渗透系数1．1材料(，em／s)的计算公式如下：1．1．1材料与仪器异硫氰酸荧光素(FITC)、蛋××黄卵磷脂，北京奥博星生物技术有限公司；乌拉式中，△△t——转运速率，s；A——肠囊坦、