一株木霉菌(trichoderma sp.)ty2纤维素酶最佳产酶条件及部分酶学特性研究

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1、新疆农业科学2010,47(7):1324—1331Xi~iangAgriculturalSciences一株木霉菌(Trichodermasp.)TY2纤维素酶最佳产酶条件及部分酶学特性研究冯蕾,2一,严琴,一,徐晓立,一,罗思施,杨新平,秦新政,陈竞,唐娴。,谢君(1.华南农业大学应用生物化学研究所,广州510642;2.广东省高校生物质能源重点实验室,广州5106423.新疆农业科学院微生物所.乌鲁木齐83oo0o)摘要:【目的】筛选高活力纤维素酶产生菌,高效利用纤维素资源。【方法】从朽木和和纸浆样品中分离筛选出一株产纤维素酶活较高的菌株TY2。对其形态和18SrDNA特

2、征序列分析鉴定为木霉菌(Trichodermasp.)。对菌株发酵条件及酶学特性进行研究。【结果】TY2菌株的最佳产酶条件为:1%滤纸+2%麸皮+0.5%葡萄糖为碳源,0.5%蛋白胨为氮源,起始pH5.0,温度28℃,200r/rain,5d,其CMCase和FPase活力分别达412.5和100.3U/mL。经分离纯化出TY2菌株内切p一葡聚糖苷酶。内切8一葡聚糖苷酶最适反应温度为6O℃,最适反应DH为4.6,在50℃以下,pH3.05.0,酶活性稳定,且在8O℃仍具有降解CMC—Na的效果。同时研究发现铜离子、锌离子、钾离子和钠离子对内切8一葡聚糖苷酶的酶活有促进作用,而汞

3、离子有明显的抑制作用。【结论】所筛选的TY2菌株具有潜在的工业应用价值。关键词:纤维素酶;木霉;发酵条件;内切G一葡聚糖苷酶;酶学特性中图分类号:S188文献标识码:A文章编号:1001—104330(2010)07—1324—08OptimalProductionEnzymeConditionofOneStrainAspergillusTrichodermaSp.Ty2andEnzymologicaICharactersFENGLei-一。YANQin。xuXiao—li一,LUOSi—shi,YANGXin—ping3,QINXin—zheng3,CHENJing3。TAN

4、GXian3。XIEJun’(1.InstituteofAppliedBiochemistry。SouthChinaAgriculturalUniversityGuangzhou510643IChina;2.BiomassEnergy脚LabofGuangdongRegularHigherEducationInstitutions,Guangzhou5106429,China;3MicrobiologyInstituteofAppliedMicrobiology。XinjiangAcademyofAgriculturalSciences,Urumqi830091,China)A

5、bstract:【ObjectiveandMethod】Thepresentresearchwasdesignedtoscreencellulaseproductionstrainwithhighactivity,tohighlyusecellulaseresources,thestrainoffunginamedTY2coulddecomposecelluloseeficiently.ItwasidentifiedasTrichodermasp.bymorphologyidentificationand18SrDNAsequenceanalysis.【Result】There

6、sultsshowedthattheoptimumcellulaseproductionconditionsforTY2producingcellulasewere1%filterpaper,2%wheatbranand0.5%glucoseascarbonsources,0.5%peptoneasnitrogensource,40mLliquidmediumin150mLflask,inoculationamount6%,theinitialpH5.0,fermentabletemperature28℃,200r/minofrotation,fermentationtime5

7、days-theenzymeactivityofCMCaseandtheFPasereached412.5U/mLand100.3U/mLrespectivelyconditions.Aendo一8一glucanasefromTY2strainwasseparatedandpurified.TheoptimaltemperatureandpHforendo一8一glucanaseactivitywereabout60℃and4.6。theenzymeactivitywasstableduri

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