一株木质纤维素酶高产菌株的选育及产酶条件研究.pdf

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1、生物三程食品，业锋枝Ko1．35No．18，2014一株木质纤维素酶高产菌株的选育及产酶条件研究陈英连，付正，张良雨，管斌。孔青(1．中国海洋大学，食品科学与工程学院，山东青岛266003)2．山东医学高等专科学校，山东济南250002)摘要：主要通过紫~l-(uv)和甲基磺酸乙酯(EMs)的交替诱变的方法提高绿色木霉的产酶能力，并成功筛选到了一株产酶活性较高的菌株，其在平板筛选培养基中的透明圈直径与菌落直径之比达到2．1，传代稳定后在产酶培养基中纤维素酶活(CMCase)和滤纸酶i~(FDAase)分别达到21．05U／rnL和2．4U／mL。之后经培养基的优化进一

2、步提高其酶活，最终诱变菌株在最佳产酶培养基中CMCase达到22．5U／mL，FDAase达到2．52U／mL。关键词：绿色木霉，诱变，纤维素酶，液体发酵ThedevelopmentofhighcellulaseproductionmutantfrOmTrichodermaVirideandstudyontheconditionofenzymeproductionCHENYing-lian，FUZheng，ZHANGLiang-yu，GUANBin*,KONGQing(1．FoodScienceAndEngineeringCollege，OceanUniversity

3、ofChina，Qingdao266003，China；2．ShandongMedicalCollege，Jinan250002，China)Abstract：ThecellulaseproductionstrainT．vMde8140wastreatedwithUVandEMS．Themutantstrainviride8140UEUE4—80wasshowedtohaveahighercellulaseactivitythanothersandtheHcofthemutantreached2．1．AfterseveraIpassagesitsCMCaseandFD

4、Aasewerestabilizedat21．05U／mLand2．4U／mLTheconditionsoffermentationwerestudiedandtheoptimaIculturemediumwasdecided．UndertheoptimaIculturemedium，theCMCaseandFPAaseofthemutantseparatelyreached22．5，252U／mLKeyWOrds：vMde；mutagenesis；cellulose；Iiquidfermentation中国分类号：TS201．3文献标识码：A文章编号：1002—03

5、06(2014)18—0189—05doi：10．13386／i．issn1002—0306．2014．18．032纤维素类物质广泛存在于自然界中，最为常见的如酸、酒精、单细胞蛋白等【3l。纤维素酶在生产还原糖为农作物秸秆。这类物质一般未经处理就被丢弃或这一重要步骤中起到了决定性作用，所以得到高产者直接将其燃烧，对环境产生了很大污染。而如果通量的纤维素酶对整个转化过程起到了关键性的作过生物方法将其转化，得到可以直接被人类或牲畜用。纤维素酶来源广泛，很多植物和微生物都可以生利用的可再生的生物资源，这不仅可以解决环境污产纤维素酶，而通过微生物发酵产纤维素酶由于其染问题，还

6、能在一定程度上缓解生物资源的短缺【1l。成本低、提取过程简便、产量高等优点多年来吸引了木质纤维素类物质其主要成分为纤维素、半纤大批的国内外研究者。维素和木质素，这三种成分随植物物种不同含量也很多微生物能够产生纤维素酶来分解纤维素成有所不同，其中纤维素和半纤维素含量占大部分l】-2]。还原糖，研究较多的是丝状真菌中的木霉属、曲霉目前对木质纤维原料的利用主要集中在纤维素和半属、根霉属和漆斑霉属，其中木霉属被广泛应用，潜纤维素的利用，所以原料的预处理即为将木质素分力较大的为绿色木霉I4-5]。有研究者利用绿色木霉与离，得到纤维素半纤维素的混合物，再利用纤维素酶其他微生物共同

7、培养，分解大米秸秆为还原糖_3’61。一将其分解为还原糖，从而进一步发酵成所需的产物，般直接从自然界分离的原始菌株其酶产量低，需利用生物学方法提高其酶活，包括理化诱变育种、基因工程育种等。其中诱变育种由于其操作简单、速度快收稿日期：2013—12—20通讯联系人及收效显著等特点被广泛利用[71。Kridztinakovaesa~O作者简介：陈英连(1989一)，女，硕士研究生，主要从事发酵工程方面用物理化学共同诱变的方法显著提高了原始菌株的的研究。基金项目：“十二五”农村领域国家科技计划(2013BADIOB02—06)；青纤维素酶产量，并利用预处理