高产纤维素酶菌株的筛选及其产酶条件的优化.pdf

《高产纤维素酶菌株的筛选及其产酶条件的优化.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、ScreeningandIdentificationofEfficientCellulase-producingFungusandOptimizationofTheFermentationConditionbyLUChenAthesissubmittedinpartialsatisfactionoftheRequirementsforthedegreeofMasterofScience1nBiochemistryandMolecularBiologyinCentralSouthUniversityofForestryandTech

2、nology498ShaoshanSouthRoad，TianxinDistrictChangshaHunan410004，ER．CHINASupervisorProfessorChenJienanandProfessorWANGYiqiangDecember,2012㈣III1111111111IUlIIIY2259341中南林业科技大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品，也不包含为

3、获得中南林业科技大学或其他教育机构的学位或证书所使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式表明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名：砖曲f乙年f2月lf日中南林业科技大学学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件或电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权中南林业科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于：1、保密

4、口，在年解密后适用本授权书。2、不保密口。，作者签名：?壤导师签名：嘶辛纠孟aof二年(≯月lf日跏c许f≯月If日硕十学位论文高产纤维素酶菌株的筛选及其产酶条件的优化摘要木质纤维是自然界最丰富的可再生资源，约占整个植物细胞干重的90％左右。一般来说，木质纤维素中含纤维素45％、半纤维素25％和木质素30％。利用纤维素酶的催化作用，可以将纤维素组分降解为还原糖形式应用于乙醇发酵等领域，并且不会对环境造成污染和产生能量消耗。就目前国内外研究现状，纤维素酶活力不高是限制木质纤维资源利用的主要因素之一，高产纤维素酶菌种的选育成为关键。利

5、用羧甲基纤维素钠培养法、刚果红染色法、滤纸崩解法和胞外纤维素酶活性测定法，从湖北神农架保护区不同区域采集的森林腐质土壤中分离筛选得到一株纤维素酶高产菌B．5。结合菌落形态观察、显微镜观察和ITS序列同源性分析，确定该菌株为镰刀菌属(Fusariumsp)，与木贼镰刀菌(FusariumEquiseti)lfH{以度达99％。滤纸崩解实验显示该菌72h对滤纸具有明显崩解能力，失重率达37．9％。以羧甲基纤维素钠为碳源，蛋白胨为氮源，28℃，180r／min，培养4d，其初始酶活为FPA酶活(FPase)2．09IU／mL，CMC酶活

6、(CMCase)5．20IU／mL。通过产酶条件优化，确定稻草秸秆粉为唯一碳源，250mL的三角瓶中装发酵液80mL，培养基初始pH为6．1，氮源添加量为1．0％，碳源添加量为2．5％，鼠李糖脂加量为O．1％，在温度为28℃，摇床转速为180r／min的条件下培养120h，最终B．5菌FPA酶活达到2．504IU／mL。研究得到镰刀菌B一5所产纤维素酶酶促反应的较适条件：4000r／min，10min离心条件获得粗酶液，温度控制在55。C，初始pH调至5．0，反应时间为标准的60min。在10mmol／L浓度下，不同金属离子对镰刀

7、菌B．5所产纤维素酶酶活性的影响结果为：C02+、Mn2+、Mf+和Fe2+是酶促离子，Na+、K+和Ca2+对酶活无明显作用，cu2+和Zn2+对纤维素酶的活性有抑制作用，其中Cu2+的抑制作用较强。关键词：纤维素酶；真菌；筛选鉴定；条件优化硕士学位论文高产纤维素酶菌株的筛选及其产酶条件的优化AbstractLignocelluloseisthemostabundantrenewableresourceinnature，accountingformorethan90％ofplantcelldryweight．Ingeneral，

8、lignocelluloseiscomposedof45％cellulose，25％hemicelluloseand30％lignin．Celluloseasthepredominentcomponentcanbedegradatedintored