肾细胞癌组织中△Np63和MDM2蛋白的表达及其临床意义.doc

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时间:2020-04-03

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1、肾细胞癌组织中4^63和MDM2蛋白的表达及其临床意义【摘要】目的探讨△Np63和MDM2蛋口在肾细胞癌组织中的表达及其与肿瘤侵袭与转移的关系。方法应用免疫组织化学SP法,检测76例肾细胞癌和14例止常肾组织中△NpGB和MDM2蛋白的表达。结果肾癌组织与正常肾组织中△Np63、MDM2蛋白的表达差异有显著性(F二28・34、22.57,q=6.471〜12.529,P<O.05);不同病理类型的肾癌组织中厶Np63、MDM2蛋口的表达差异均无显著性(q二0.093〜2.169,P>0.05);不同临床分期肾癌组织中△Np63、MDM2蛋白的表达差异有显著性(F二2

2、4.59、10.82,q=4・694〜11.971,P<0.05)o△Np63和MDM2蛋白的表达存在着显著相关性(rs=0.513,P<0・05)。结论4^63和MDM2蛋白可以作为反映肾细胞癌侵袭和转移潜能的生物学指标。【关键词】肾肿瘤4^63原癌基因蛋白质cmdm2免疫组织化学[ABSTRACT]ObjectiveToexploretheexpressionsof△Np63andMDM2proteinsinrenalcellcareinoma(RCC)andtheirrelationshipwiththetumorinvasionandmetastasis・M

3、ethodsUsingimmunohistochemicalmethod,ANp63andMDM2in76RCC,and14normalrenaltissuesweredetected・ResultsTheexpressionsofANp63andMDM2inRCCandinnormalrenaltissueshowed(F=28.34,22.57;q=6.471-12.529;P<0.05);whichwerenotrelatedtopathologicaltype(q=0.093-2.169,P>0.05),butrelatedtoclinicalstaging

4、(F二2459,10.82;q二4.694T1.971;卩&It;0.05)・Therewassignificantcorrelationbetweentheexpressionsof△Np63andMDM2(rs=0.513,P<0.05).ConclusionTheexpressionsofANp63andMDM2maybeusedasbiologicalparametersreflectinginvasionandmetastasisofthiscancer・signifiedntlydifferentbetweenthem[KEYWORDS]Kidneyneopl

5、asms;ANp63;Protooncogeneproteinscmdin2;Tinmunohistochemistry肾细胞癌是人类泌尿系统常见的恶性肿瘤,且发病率呈增高趋势。分子生物学研究表明,其能预测肿瘤的生物学行为,为肿瘤的诊断和治疗及术后检测提供新的依据。本研究旨在通过免疫组织化学方法观察△Np63和MDM2蛋白在肾细胞癌屮的表达情况及其意义,探讨二者在肾细胞癌发生发展中可能发挥的作用,从而为临床早期判断肾癌的生物学行为和寻求新的治疗途径提供参考资料。现将结果报告如下。1材料与方法1.1材料实验组76例标本均为我院2000〜2006年间手术切除的肾细胞癌标本。其中男4

6、6例,女30例;年龄34〜85岁,平均56.2岁。病理学分型为:透明细胞癌48例,嗜色细胞癌10例,嫌色细胞癌5例,未分类型及其他13例。ROBSON分期:I期16例,II期29例,III期14例,IV期17例。有淋巴结转移31例,无淋巴结转移45例。对照组14例肾组织均取口离肿瘤2cm以上的正常肾组织。1.2方法1.2.1主要试剂及来源小鼠抗人MDM单克隆抗体(Dako公司),ANp63鼠抗人单克隆抗体浓缩液(SantaCruz公司),SP免疫组化试剂盒(通用型),DAB显色试剂盒,EDTA抗原修复缓冲液和柠檬酸抗原修复缓冲液(福建迈新公司)。1.2.2免疫组织化学染色石蜡切

7、片二甲苯脱蜡,梯度乙醇水化,0.01mmol/LPBS冲洗5niin,共3次。根据每一种抗体的耍求,对组织抗原进行相应的修复(其中P63为柠檬酸,pH6.0修复,MDM2为EDTA,pH&0修复)。每张切片滴加体积分数为0.03的H202双蒸水溶液,室温下放置10min,用PBS振洗5min,共3次。滴加正常非免疫动物血清,室温放置lOmin,甩去多余液体不洗。滴加适当稀释的一抗(P63为1:100,MDM2为1:75),于湿盒内室温下放置1h,PBS振洗5min,共3次。滴加生物素化二抗,

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