膀胱移行细胞癌组织δnp63和mdm2蛋白表达及意义论文

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1、膀胱移行细胞癌组织ΔNp63和MDM2蛋白表达及意义论文【摘要】目的探讨缺乏酸性N端反式激活区的截短型p63（ΔNp63）和MDM2蛋白在膀胱移行细胞癌（TCC）组织中的表达及其临床意义。方法用免疫组织化学法，检测35例石蜡包埋TCC组织标本中ΔNp63和MDM2的表达，以38例正常膀胱黏膜作为对照。结果膀胱癌组30例(83.3%)ΔNp63蛋白呈阳性表达，膀胱黏膜组7例(18.4%)呈阳性表达，两组比较差异有显著性（uc=5.75，P0.01）。膀胱癌组15例(42.9%)MDM2蛋白呈阳性表达，膀胱

2、黏膜组3例(7.9%)呈阳性表达，两组差异有显著性（χ2＝11.99,P0.01）。在不同病理分级、临床分期TCC中.freela(TCC)anditssignificance.MethodsImmunohistochemicalmethodaltransitionalepitheliumsamples.ResultsThepositiveratesofΔNp63andMDM2expressioninTCCalcontrol,thepositiveratesofΔNp63andMDM2expressio

3、noror(χ2=6.72,16.63;P0.05,0.01).Thereentofthemalignancylevelofthiscancer.［KEYDM2;immunohistochemistry膀胱肿瘤是人类泌尿系统最常见的恶性肿瘤，其发病率呈增高趋势。近年关于癌基因的研究成为热点。为研究膀胱移行细胞癌（TCC）发生发展规律，本文应用免疫组化技术分别检测TCC组织中ΔNp63和MDM2的表达，探讨其在膀胱肿瘤发生发展中的作用及临床意义。1对象和方法1.1研究对象收集2001～2004年间我院手术

4、的膀胱移行细胞癌病理标本35例作为膀胱癌组。35例病人中，男29例，女6例；年龄34～88岁，平均64岁。DM单克隆抗体（北京中山公司），ΔNp63鼠抗人单克隆抗体浓缩液（SantaCruz公司），SP免疫组化试剂盒（通用型）、DAB显色试剂盒、EDTA抗原修复缓冲液和柠檬酸抗原修复缓冲液（福建迈新公司）。1.3实验方法采用免疫组织化学染色法进行染色。按试剂盒说明书进行操作。一抗P63浓度为1∶100，MDM2浓度为1∶75。滴加生物素化二抗，DAB显色，梯度乙醇脱水，中性树胶封片，显微镜下观察结果。

5、分别采用已知的阳性切片和PBS代替一抗作为阳性和阴性对照。1.4结果判定1.4.1ΔNp63蛋白表达ΔNp63蛋白表达主要位于细胞核，呈棕黄色颗粒。随机选取5个高倍视野（坏死区除外），计数500个细胞，根据阳性细胞占细胞总数的百分数判定结果：阳性细胞百分数＜25%为(+)；介于25%～50%为()；50%为()；无阳性细胞为（-）。1.4.2MDM2阳性结果判定光镜下肿瘤细胞核染成棕黄色，为免疫反应阳性细胞，有时胞浆可部分着色。双盲法每张切片中选择代表区域,.freelplificationinme

6、tastaticosteosaraJ.CancerRes,1993,53(1):816.2REISFILHOJS,SIMPSONPT,MARTINSA,etal.Distributionofp63,cytokeratins5/6andcytokeratin14in51normaland400neoplastichumantissuesamplesusingTARP4multitumortissuemicroarrayJ.VirchArch,2003,443:122132.3YANGA,KAGHA

7、DM,olCell,1998,2:305316.4CELLIJ,DUIJFP,HAMELB,etal.Heterozygousgermlinemuationsinthep53homologp63arethecauseofEECsyndromeJ.Cell,1999,99:143153.5YANGA,CKEON.p63andp73:p53mimics,menacesandmoreJ.NatRevMolCellBiol,2000,1:199207.6HUH,XIASH,LIAD,etal.Associ

8、ationofp63alandneoplastichumankeratinocytesJ.InvestDermatol,1999,113:10991105.7ICHARDZR.Prognositicimpactofp63andp53expressioninupperurinarytracttransitionalcellcarcinaomaJ.Urology,2004,54:10791083.8MARSHALLJ,CHARLESJ.Lo