膀胱移行细胞癌组织δnp63和mdm2蛋白表达及意义

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1、膀胱移行细胞癌组织ΔNp63和MDM2蛋白表达及意义【摘要】目的探讨缺乏酸性N端反式激活区的截短型p63（ΔNp63）和MDM2蛋白在膀胱移行细胞癌（TCC）组织中的表达及其临床意义。方法用免疫组织化学法，检测35例石蜡包埋TCC组织标本中ΔNp63和MDM2的表达，以38例正常膀胱黏膜作为对照。结果膀胱癌组30例(83.3%)ΔNp63蛋白呈阳性表达，膀胱黏膜组7例(18.4%)呈阳性表达，两组比较差异有显著性（uc=5.75，P<0.01）。膀胱癌组15例(42.9%)MDM2蛋白呈阳性表达

2、，膀胱黏膜组3例(7.9%)呈阳性表达，两组差异有显著性（χ2＝11.99,P<0.01）。在不同病理分级、临床分期TCC中，ΔNp63表达差异有显著性（H=21.09、14.99,P<0.01）。随着TCC病理分级、临床分期升高，ΔNp63表达明显增强，呈显著正相关（r=0.64、0.51,P<0.01）。在不同病理分级、临床分期TCC中，MDM2表达差异有显著性（χ2＝16.63,P<0.01；χ2＝6.72,P<0.05）。30例ΔNp63蛋白阳性表达TCC组织中M

3、DM2蛋白阳性表达10例（33.3%），两者呈显著相关性（χ2=7.78，P<0.05）。ΔNp63阳性表达主要集中在低分化、浸润性TCC中，而MDM2则主要表达在高分化、浅表TCC中。结论ΔNp63和MDM2与膀胱肿瘤的发生发展密切相关，可作为膀胱肿瘤早期诊断和判断恶性程度的参考指标。【关键词】膀胱肿瘤ΔNp63MDM2免疫组织化学［ABSTRACT］ObjectiveToexploretheexpressionofΔNp63andMDM2proteinsinbladdertransition

4、alcellcarcinoma(TCC)anditssignificance.MethodsImmunohistochemicalmethodaltransitionalepitheliumsamples.ResultsThepositiveratesofΔNp63andMDM2expressioninTCCalcontrol,thepositiveratesofΔNp63andMDM2expressionoror(χ2=6.72,16.63;P<0.05,0.01).Thereentofthe

5、malignancylevelofthiscancer.［KEYDM2;immunohistochemistry膀胱肿瘤是人类泌尿系统最常见的恶性肿瘤，其发病率呈增高趋势。近年关于癌基因的研究成为热点。为研究膀胱移行细胞癌（TCC）发生发展规律，本文应用免疫组化技术分别检测TCC组织中ΔNp63和MDM2的表达，探讨其在膀胱肿瘤发生发展中的作用及临床意义。1对象和方法1.1研究对象收集2001～2004年间我院手术的膀胱移行细胞癌病理标本35例作为膀胱癌组。35例病人中，男29例，女6例；年龄34～8

6、8岁，平均64岁。DM单克隆抗体（北京中山公司），ΔNp63鼠抗人单克隆抗体浓缩液（SantaCruz公司），SP免疫组化试剂盒（通用型）、DAB显色试剂盒、EDTA抗原修复缓冲液和柠檬酸抗原修复缓冲液（福建迈新公司）。1.3实验方法采用免疫组织化学染色法进行染色。按试剂盒说明书进行操作。一抗P63浓度为1∶100，MDM2浓度为1∶75。滴加生物素化二抗，DAB显色，梯度乙醇脱水，中性树胶封片，显微镜下观察结果。分别采用已知的阳性切片和PBS代替一抗作为阳性和阴性对照。1.4结果判定1.4.1ΔN

7、p63蛋白表达ΔNp63蛋白表达主要位于细胞核，呈棕黄色颗粒。随机选取5个高倍视野（坏死区除外），计数500个细胞，根据阳性细胞占细胞总数的百分数判定结果：阳性细胞百分数＜25%为(+)；介于25%～50%为()；>50%为()；无阳性细胞为（-）。1.4.2MDM2阳性结果判定光镜下肿瘤细胞核染成棕黄色，为免疫反应阳性细胞，有时胞浆可部分着色。双盲法每张切片中选择代表区域,400倍光镜下计数1000个细胞，阳性细胞数≥1%为阳性。1.5统计学处理应用SPSS10.0统计学分析软件进行数据处

8、理。数据间比较用等级秩和及χ2检验，相关性分析采用直线相关。2结果2.1ΔNp63蛋白表达膀胱癌组30例(83.3%)ΔNp63蛋白阳性表达，其中（＋）6例，（）15例，（）9例；膀胱黏膜组7例(18.4%)呈阳性表达，其中（＋）6例，（）1例，两组差异有显著性（uc=5.75，P<0.01）。2.2MDM2蛋白表达膀胱癌组15例(42.9%)MDM2蛋白表达呈阳性，膀胱黏膜组3例(7.9%)呈阳性表达。两组差异有显著性（χ2＝11.99,P