膀胱移行细胞癌组织δnp63和mdm2蛋白表达及

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1、膀胱移行细胞癌组织ΔNp63和MDM2蛋白表达及【摘要】目的探讨缺乏酸性N端反式激活区的截短型p63(ΔNp63)和MDM2蛋白在膀胱移行细胞癌(TCC)组织中的表达及其临床意义。方法用免疫组织化学法,检测35例石蜡包埋TCC组织标本中ΔNp63和MDM2的表达,以38例正常膀胱黏膜作为对照。结果膀胱癌组30例(83.3%)ΔNp63蛋白呈阳性表达,膀胱黏膜组7例(18.4%)呈阳性表达,两组比较差异有显著性(uc=5.75,P<0.01)。膀胱癌组15例(42.9%)MDM2蛋白呈阳性表达,膀胱黏膜组3例(7.9%)呈阳性表达,两组

2、差异有显著性(χ2=11.99,P<0.01)。在不同病理分级、临床分期TCC中,ΔNp63表达差异有显著性(H=21.09、14.99,P<0.01)。随着TCC病理分级、临床分期升高,ΔNp63表达明显增强,呈显著正相关(r=0.64、0.51,P<0.01)。在不同病理分级、临床分期TCC中,MDM2表达差异有显著性(χ2=16.63,P<0.01;χ2=6.72,P<0.05)。30例ΔNp63蛋白阳性表达TCC组织中MDM2蛋白阳性表达10例(33.3%),两者呈显著相关性(χ2=7.78,P<

3、0.05)。ΔNp63阳性表达主要集中在低分化、浸润性TCC中,而MDM2则主要表达在高分化、浅表TCC中。结论ΔNp63和MDM2与膀胱肿瘤的发生发展密切相关,可作为膀胱肿瘤早期诊断和判断恶性程度的参考指标。【关键词】膀胱肿瘤ΔNp63MDM2免疫组织化学[ABSTRACT]ObjectiveToexploretheexpressionofΔNp63andMDM2proteinsinbladdertransitionalcellcarcinoma(TCC)anditssignificance.MethodsImmunohistochemi

4、calmethodaltransitionalepitheliumsamples.ResultsThepositiveratesofΔNp63andMDM2expressioninTCCalcontrol,thepositiveratesofΔNp63andMDM2expressionoror(χ2=6.72,16.63;P<0.05,0.01).Thereentofthemalignancylevelofthiscancer.[KEYDM2;immunohistochemistry膀胱肿瘤是人类泌尿系统最常见的恶性肿瘤,其发病率呈增

5、高趋势。近年关于癌基因的研究成为热点。为研究膀胱移行细胞癌(TCC)发生发展规律,本文应用免疫组化技术分别检测TCC组织中ΔNp63和MDM2的表达,探讨其在膀胱肿瘤发生发展中的作用及临床意义。1对象和方法1.1研究对象收集2001~2004年间我院手术的膀胱移行细胞癌病理标本35例作为膀胱癌组。35例病人中,男29例,女6例;年龄34~88岁,平均64岁。DM单克隆抗体(北京中山公司),ΔNp63鼠抗人单克隆抗体浓缩液(SantaCruz公司),SP免疫组化试剂盒(通用型)、DAB显色试剂盒、EDTA抗原修复缓冲液和柠檬酸抗原修复缓冲液

6、(福建迈新公司)。1.3实验方法采用免疫组织化学染色法进行染色。按试剂盒说明书进行操作。一抗P63浓度为1∶100,MDM2浓度为1∶75。滴加生物素化二抗,DAB显色,梯度乙醇脱水,中性树胶封片,显微镜下观察结果。分别采用已知的阳性切片和PBS代替一抗作为阳性和阴性对照。1.4结果判定1.4.1ΔNp63蛋白表达ΔNp63蛋白表达主要位于细胞核,呈棕黄色颗粒。随机选取5个高倍视野(坏死区除外),计数500个细胞,根据阳性细胞占细胞总数的百分数判定结果:阳性细胞百分数<25%为(+);介于25%~50%为();>50%为();无阳

7、性细胞为(-)。1.4.2MDM2阳性结果判定光镜下肿瘤细胞核染成棕黄色,为免疫反应阳性细胞,有时胞浆可部分着色。双盲法每张切片中选择代表区域,400倍光镜下计数1000个细胞,阳性细胞数≥1%为阳性。1.5统计学处理应用SPSS10.0统计学分析软件进行数据处理。数据间比较用等级秩和及χ2检验,相关性分析采用直线相关。2结果2.1ΔNp63蛋白表达膀胱癌组30例(83.3%)ΔNp63蛋白阳性表达,其中(+)6例,()15例,()9例;膀胱黏膜组7例(18.4%)呈阳性表达,其中(+)6例,()1例,两组差异有显著性(uc=5.75

8、,P<0.01)。2.2MDM2蛋白表达膀胱癌组15例(42.9%)MDM2蛋白表达呈阳性,膀胱黏膜组3例(7.9%)呈阳性表达。两组差异有显著性(χ2=11.99,P&l

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