斑点金免疫渗滤法联合检测糖尿病自身抗体的研究

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1、·70·免疫学杂志2014年1月第30卷第1期IMMUNOLOGICALJOURNALVo1．30No．1Jan．2014·论著·【文章编号]1000-8861(2014)01-0070-05斑点金免疫渗滤法联合检测糖尿病自身抗体的研究李涛，程立庆，陈兵[摘要】目的构建联合检测糖尿病自身抗体的斑点金免疫渗滤法(dotimmunogoldfiltrationassay，DIGFA)。方法将重组人胰岛素、谷氨酸脱羧酶、蛋白酪氨酸磷酸酶和锌转运体8抗原点样于硝酸纤维素膜上，制备胶体金标记链霉亲和素作为显色探针，建立斑点金免疫渗滤法检测1型糖尿病(type1diabetes，T1DM)

2、患者外周血中相应的自身抗体，并对方法性能开展评估。结果DIGFA法检测42例T1DM敏感性66．7％，检测100例健康对照特异性97％。与ELISA法相比对T1DM自身抗体检出率无显著差异(P>0．05)。3个批次的免疫渗滤装置检测结果一致，4℃保存10周内检测性能稳定。结论本研究构建的斑点金免疫渗滤法准确、快速、简便，为联合检测糖尿病自身抗体提供了一种高效的新途径。【关键词】1型糖尿病；自身抗体；斑点金免疫渗滤试验【中图分类号】R446．6【文献标识码】ADevelopmentofdotimmunogoldfiltrationassayforthesimultaneousde

3、tectionofdiabetesautoantibodiesLITao，CHENGLiqing，CHENBingDepartmentofEndocrinology,SouthwestHospital,ThirdMilitaryMedicalUniversity,Chongqing400038,ChinaCorrespondingAuthor：CHENBing,E—mail：chenbing3@medmail．com．cn[Abstract]Thisstudydesignedtodevelopadotimmunogoldfiltrationassay(DIGFA)forsimu

4、haneousdetectionofmultiplediabetesautoantibodies．Recombinanthumaninsulin，glutamicaciddecarboxylase(GAD)，tyrosinephosphatase2(IA一2)，andzinctransporter8(ZnT8)antigenwerecoatedontonitrocellulosemembrane，andstreptavidinwasconjugatedwithcolloidgoldasstainedprobe．Thedotimmunogoldfiltrationassaywas

5、establishedandusedtodetectautoantibodiesinseraoftype1diabetes．TestresultshowedthatthesensitivityofDIGFAwas66．7％in42T1DMpatientsandthespecificitywas97％in100healthyindividuals；therewasnosignificantdifferenceinthedetectingresultsofT1DMpatientsbetweenDIGFAandELISAkitfP>0．05)．Furthermore．testresu

6、ltsof3batchesofimmunogoldfiltrationdevicewereconsistentandstableperformancewasexhibitedafter10weekslaterstoredunder4oc．Inconclusion。theDIGFAiSanaccurate．rapid．andsimplemethodwhichcanprovideanovelefficientapproachtosimultaneousdetectionofmultiplediabetesautoantibodies．【l【eywords]Typeldiabetes

7、；Autoantibodies；Dotimmunogoldfiltrationassay糖尿病(diabetesmellitus，DM)的发病机理包括胰酶自身抗体(GADA)、蛋白酪氨酸磷酸酶自身抗体岛素的绝对或相对缺乏，前者是1型糖尿病(T1DM)fIA一2A)、锌转运体8自身抗体(ZNT8A)。由于不同自的特征。但多数2型糖尿病(T2DM)患者或早或晚也身抗体各具特点，单个指标检测的敏感性和特异性各会进入胰岛素绝对缺乏阶段，且近年来2型糖尿病有有缺陷，因此目前常采用多种自身抗体联合检测网