miR-218抑制卵巢癌细胞A2780对顺铂耐药性的实验研究.pdf

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1、2013年8月第2O卷第22期·论著·miR-218抑制卵巢癌细胞A2780对顺铂耐药性的实验研究饶玉梅·陈彩虹1．郑州大学第一附属医院妇产科，河南郑州450002；2．郑州大学第一附属医院生殖中心，河南郑州450002【摘要】目的研究miR一218抑制卵巢癌细胞A2780对顺铂耐药性的影响及可能机制。方法实时定量PCR检测A2780及顺铂耐药细胞株A2780／DDP中miR一218的表达，转染miR一218inhibitors和mimics改变A2780及A2780／DDP细胞中miR一218的表达，M，rr法检测转染前后细胞对顺铂的敏感

2、性，并分析Wnt2B蛋白表达的改变。结果与A2780细胞相比，miR一218在A2780／DDP中的表达明显降低。A2780细胞转染miR一218inhibitors后，细胞对顺铂的敏感性降低，Wnt2B蛋白表达明显增强；而A2780／DDP细胞转染miR一218mimics后，细胞对顺铂的敏感性增强，Wnt2B蛋白表达明显减少。结论miR一218可能通过靶向Wnt2B抑制卵巢癌细胞A2780对顺铂的耐药性。【关键词1miR-218；卵巢癌；顺铂耐药性；Wnt2B【中图分类号1R737．31【文献标识码】A【文章编号】1674—4721(2

3、013)08(a)一0007—04Research0fmiR-218inhibitcisplatinresistance0fovariancancerA2780CeIlSA0yu—meiCHENCai一D，1．DepartmentofObstetricsandGynecology，theFirstAffiliatedHospitalofZhengzhouUniversity，Zhengzhou450002，China；2．CenterofReproductiveMedicine，theFirstAffiliatedHospitalofZhe

4、ngzhouUniversity，Zhengzhou450002，China[Abstract]ObjectiveToexploretheeffectofmiR——218inhibitcisplatinresistanceofovariancancerA2780cellsandmechanism．MethodsTheexpressionofmiR一218inA2780andA2780／DDPcellswasdetectedbyreal—timePCR．MiR一218inhibitorsandmimicsweretransientlytran

5、sfectedintoA2780andA2780／DDPcellsrespectively．ThedrugsensitivityofcellstocisplatinandtheexpressionlevelofWnt2BweredetectedbyM1fI’assayandWesternblotting．ResultsTheexpressionofmiR一218inA2780／DDPcellswassignificantlydecreasedcomparedwithA2780cells．KnockdownofmiR一218dramatica

6、llyincreasedproliferativeeffectinducedbycisplatinandexpressionofWnt2BinA2780，whileoverexpressionofmiR-218signicantlydecreasedproliferativeeffectinductionbycisplatinandexpressionofWnt2BinA2780／DDP．ConclusionThecisplatinresistanceofA2780ovariancancerceilsiSinhibitedbymiR一2l8

7、．anditismaybebytargetingofWnt2Bexpression．【Keywords】MiR-218；Ovariancancer；Cisplatinresistance；Wnt2B卵巢癌死亡率位于女性生殖系统肿瘤之首，在女性肿DDP。均获赠于华中科技大学同济医院肿瘤生物研究中心。瘤死亡率中位于第五位，多数死亡原因是肿瘤化疗耐药-21。RPMI1640培养基、小牛血清、脂质体2000(美国Life肿瘤耐药是个复杂的问题，涉及药物在体内及细胞内的转Technologies公司)。顺铂、噻唑蓝(MTT)(美国Sigma公司)。运

8、、代谢、细胞的损伤与修复等多个方面【31。miR一218mimics和inhibitors及阴性对照(美国DharmaconmicroRNA是一种非编码的小核糖核酸，其在自然界公