超声辅助磷酸提取油橄榄叶中羟基酪醇工艺研究

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1、第203l23卷年第l24期月成都大学学报(自然科学版)V_o1．32NO．4JournalofChengduUniversity(NaturalSc~enceEdition)Dec．20l3文章编号：1004—5422(2013)04—0328—04超声辅助磷酸提取油橄榄叶中羟基酪醇工艺研究李春燕，颜军，刘嵬，苟小军(成都大学药食同源植物资源开发四川省高校重点实验室，四川成都610106)摘要：建立HPLC测定羟基酪醇的方法，通过单因素实验和正交实验优化，以羟基酪醇的含量为考察指标，确定超声辅助磷酸提取羟基酪醇的最佳工艺，研究超声辅助磷酸提取油橄榄叶中羟基酪醇的工艺，实验结果显示

2、：羟基酪醇在3．75—120HlL范围内线性关系良好；超声辅助磷酸提取羟基酪醇的最佳奈件为，磷酸浓度为2moPL，液料比为40：1(mL：g)，超声时间为60rain，此条件下羟基酪醇的含量为5．13ma'g．该方法工艺简单，处理量大，可为油橄榄叶中羟基酪醇的提取提供依据．关键词：油橄榄叶；羟基酪醇；磷酸；高效液相色谱法中图分类号：TS201文献标志码：A谱纯)、磷酸、盐酸、冰乙酸(成都科龙化工有限公0引言司)，实验所用溶剂除用作HPLC测定为色谱纯外，羟基酪醇，又名3，4一二羟基苯乙醇，最早是从其余均为分析纯．橄榄油中提取得到的酚类化合物_1]，天然羟基酪醇1．2仪器主要产自于橄

3、榄树，尤其是其叶子和果实，羟基酪醇实验所用仪器包括：微型高速万能试样粉碎机主要是以酯化物橄榄苦苷的形式存在于油橄榄叶(北京中兴伟业仪器有限公司)，KQ3200超声波清洗中．橄榄苦苷的性质不稳定，在酸、碱和酶的作用下仪(昆山市超声仪器有限公司)，L一2000高效液相易降解为羟基酪醇和榄香酸J．相关研究表明，羟基色谱仪、二极管阵列检测器(日立仪器设备公司)，酪醇具有抗癌、抗血栓、抗菌、抗病毒等功能，能够预FA10004B分析天平(上海越平科学仪器有限公司)．防肿瘤，降低心血管疾病的发病率，并且羟基酪醇具1．3方法有刺激线粒体的合成和促进脂肪细胞线粒体的功1．3．1羟基酪醇的测定．能I7

4、J．目前，天然羟基酪醇的生产方法主要是从橄本研究对羟基酪醇的测定按照文献[9]所建立榄压榨后的废水和橄榄果汁中提取，但有研究发现，的HPLC方法并做适当改进．实验色谱条件为：色谱油橄榄叶中的橄榄苦苷和羟基酪醇含量明显高于果柱为AkasilC18(5pan，4．6illm×250mm)，流动相为实．基于此，本研究采用正交试验优化羟基酪醇的12％甲醇一磷酸溶液，检测波长为230nIn，柱温为提取条件，以羟基酪醇的含量为指标，以磷酸浓度、35cC，流速为1mldmin，进样量为8O．液料比、提取时间和提取温度为因素，通过超声辅助1．3．2羟基酪醇标准品溶液的配制．提取来确定油橄榄叶中羟基

5、酪醇的最佳提取工艺，精密称取羟基酪醇标准品溶液1．20mg，置于拟为油橄榄工业化生产提供基础实验依据，为油橄10mL容量瓶中，用12％甲醇一磷酸溶液溶解并定榄叶的综合利用开辟新的途径．容，摇匀后，配成浓度为120t~g／mL的溶液．按对半稀释法，依次配制浓度为60tdmL、30t~g／mL、151材料、仪器与方法mL、7．5t~g／mL和3．75t~g／mL的溶液．1．1材料1．3．3提取剂的选择．实验所用的材料包括：油橄榄叶(四川天源油橄精密称取油橄榄叶1g，共3份，依次将1mol／L榄有限公司，干燥粉碎)，羟基酪醇标准品、甲醇(色的磷酸、盐酸和冰乙酸各30mL加入三角瓶中与油收

6、稿日期：2013—09—26．作者简介：李春燕(1986一)，女，硕士研究生，从事功能性食品与药食同源植物资源开发研究第4期李春燕，等：超声辅助磷酸提取油橄榄叶中羟基酪醇工艺研究·329·橄榄叶混合，常温下，超声60min，提取完全后，用2002000．45脚的微孔滤膜过滤后做HPLC分析．1．3．4羟基酪醇超声提取单因素试验．1001O0在实验中，首先对磷酸浓度、液料比、提取时间和提取温度进行单因素试验．其中：磷酸浓度分别为0．1rnol／L、0．5mol／L、1mol／L、2mol／L、3mol／L和4tool／L；液料比(mL：g)分别为5：1、10：1、20：1、30：1、

7、40：1和50：1；提取时间分别为10、20、3O、4O、50、6o、(b)磷酸提取羟基酪醇的H~LC色谱图80rain；提取温度分别为2O、25、3O、35、4O、45、50qC．1．3．5羟基酪醇超声提取正交试验．根据单因素试验结果，选取磷酸浓度、液料比和1O01O0提取时间3个因素，采用L日(3。)正交试验，以此优化油橄榄叶中羟基酪醇超声提取的最佳条件．2结果与讨论0102030Min~6s2．1羟基酪醇标准曲线的绘制(c)盐酸提取羟基酪醇的I-~LC色谱图将“