天山花楸叶中总黄酮超声提取工艺研究

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1、天山花楸叶中总黄酮超声提取工艺研究作者：芮鸣，唐辉，王鲁石，马伟伟，王玉梅【摘要】目的研究天山花楸中总黄酮最佳提取工艺。方法采用正交实验，分别以比色法测定总黄酮提出率和高效液相色谱（HPLC）图谱中总黄酮相对积分峰面积为指标，考察提取温度、料液比、醇浓度对天山花楸叶中总黄酮提出率的影响。结果最终确定天山花楸叶中总黄酮的最佳提取条件为：温度60℃，醇浓度为60％，料液比1∶10(g∶ml)，其中超声功率60kHz，时间30min，在相同条件下连续提取两次。结论该提取工艺合理，总黄酮提取率高，质量易于控制。【关键词】天山花楸；超声提取；总黄酮

2、；高效液相色谱图谱；相对积分峰面积　　Abstract：ObjectiveTostudytheoptimumextractionprocessoftotalflavonoidsfromSorbustianshanicaRupr.MethodsintegralrelativepeakareaoftotalflavonoidsinHPLCchromatogramsastheindex,orthogonalexperimentperature,solid-liquidleachingrate,concentrationofalcohol,pac

3、ttheyieldoftotalflavonoidsfromSorbustianshanicaRupr.ResultsTheresultsoftheorthogonalexperimentshoumconditionsforultrasonicextractionperature60℃,60%ethanol,solid-to-liquidratio1/10g/ml,andextract2timesat60kHzofacousticpoinutes.ConclusionTheextractiontechnologyisreasonable,

4、theyieldoftotalflavonoidsishighandthequalityiseasilycontrolled.　　Keyatograms;Integralrelativepeakarea　　天山花楸SorbustianshanicaRupr为蔷薇科(Rosaceae)花楸属植物(Sorbus)，系新疆维吾尔族和哈萨克族民间用药，常用于治疗肺结核、哮喘、咳嗽、胃痛等症［1］。实验研究表明天山花楸叶具有平喘镇咳祛痰、依赖性地抑制心肌收缩和保护心肌缺血等作用［2］。本课题组药效筛选实验发现天山花楸中有效成分主要为黄酮类化合物。天

5、然来源的生物黄酮分子量小，能被人体迅速吸收，能通过血脑屏障，能进入脂肪组织，是许多中草药的有效成分，具有很高的药用价值。黄酮类化合物具有消除疲劳、保护血管、预防动脉硬化、扩张毛细血管、疏通微循环、抗脂肪氧化、活化大脑及其他脏器细胞的功能［3］。药理作用表现为抗炎镇痛、抗病毒，抗辐射、抗癌抗肿瘤［4］，抗氧化、抗衰老、抗心脑血管疾病［5］，免疫调节、降血糖、治疗骨质疏松等。传统的黄酮提取方法有浸渍法、索氏法、回流法等，提取时间较长,并影响提出率。超声提取是目前比较新的技术，超声波产生的强烈振动、高的加速度、强烈的空化效应、搅拌作用等，都可加

6、速药物有效成分进入溶剂，从而提高了有效成分提出率,缩短了提取时间，节约了溶剂，并且避免了高温对有效成分的影响［6］，因此把超声技术用于中药有效成分的提取越来越受到重视。　　1材料美国AgilentHP1100型高效液相色谱系统（配有：四元泵，紫外检测器，HP1100化学工作站）；日本岛津UV2401（PC）紫外光谱仪；德国SartoriusBP211D十万分之一电子分析天平；SK5200HP超声清洗器（上海科导超声仪器有限公司）；甲醇、乙腈为色谱纯，水为纯净水，磷酸、乙醇及其它试剂均为分析纯；芦丁对照品由中国药品生物制品鉴定所提供；天山花

7、楸供试品采自新疆玛纳斯林场，海拔2000～2500m，由石河子大学药学院成玉怀高级实验师鉴定为蔷薇科(Rosaceae)花楸属植物(Sorbus)。　　2方法与结果　　2.1亚硝酸钠-硝酸铝比色法测样品中总黄酮含量芦丁标准曲线的绘制:精密称取芦丁对照品20mg于50ml量瓶中，超声溶解，用60％乙醇定容至刻度，摇匀备用。分别精密移取上述对照品溶液1.0，1.5，2.0，2.5，3.0，3.5，4.0ml于25ml量瓶中加60％乙醇至6.0ml，加5%亚硝酸钠溶液1.0ml放置6min，加入8%硝酸铝溶液1.0ml放置6min，加入5％氢氧

8、化钠试液10ml定容，放置15min后以试剂空白为参比溶液于510nm测吸光度。得回归方程为：Y＝12.058X－0.0028，r＝0.9999，芦丁在0.0162～0.0727mg/ml浓度