天山花楸中总黄酮含量的测定

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1、天山花楸中总黄酮含量的测定【摘要】目的采用比色法测定天山花楸中总黄酮的含量。方法以芦丁作对照品，以亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠体系为显色剂,检测波长为510nm。结果线性范围为0.0103～0.0515mg·ml-1，平均回收率为98.8%，相对标准偏差(RSD)为1.3%。结论该法为控制天山花楸的内在质量提供了依据。【关键词】天山花楸总黄酮比色法　　Abstract:ObjectiveToanalyzethetotalcontentofflavonoidsinSorbustianschanicaRuperbycolorimetricmethod.Methods

2、Rutin.ResultsThelinearityofflavonoidsg/ml,averagerecoveryrateethodcanbeusedforthecontroloftheinherentqualityinSorbustianschanicaRuper.　　Keyetricmethod　　天山花楸为蔷薇科花楸属植物天山花楸SorbustianschanicaRuper的嫩枝叶，为落叶乔木或灌木［1］。全世界约有80种,我国约有50种,主要分布在东北、西北、西南等地区,新疆地区有3种，主要分布在新疆哈密至伊犁的天山山脉里。用于治疗慢性气管炎、肺结核

3、、哮喘、咳嗽、水肿、胃痛，具有平喘及依赖性地抑制心肌收缩和保护心肌缺血等病症［2］。天山花楸味甘苦，性平，具有补脾生津的作用。民间常以嫩枝叶，果实和茎皮入药用［3］。为了进一步开发和利用其药用价值，本实验对天山花楸的总黄酮含量进行了测定，目前尚未见相关报道。　　1仪器与试剂　　TU1800型紫外分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)；电热恒温水浴锅（型号：HHS4）；电子天平（型号：AB104N）；芦丁对照品由中国药品生物制品检定所提供，亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、甲醇试剂均为分析纯，实验用水为蒸馏水。　　天山花楸野生，200507采集于新疆米泉铁

4、仓沟，经新疆医科大学生药学教研室帕丽达教授鉴定为Sorbustianschanicaruper的嫩枝叶。　　2方法与结果　　2.1天山花楸黄酮类化合物的提取取天山花楸2.5g精密称定，置100ml圆底烧瓶中，加入甲醇50ml，回流2h，滤过，提取液置100ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，待用。　　2.2标准曲线的绘制精密称取芦丁对照品10.3mg,置100ml容量瓶中，加入甲醇70ml，置水浴中微热使溶解，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，得浓度为0.103mg·ml-1的标准溶液。精密量取对照品溶液0.0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml，置10ml量瓶中

5、，分别加甲醇5ml，再分别加5%NaNO2溶液0.3ml，摇匀，放置6min；再加10%Al（NO3）3溶液0.3ml，摇匀，放置6min；再加10%NaOH溶液4.0ml，摇匀，室温放置15min。在510nm波长处测定吸光度，同时以试剂空白作参比。以吸光度为纵坐标，溶液质量浓度为横坐标，绘制标准曲线。　　2.3测定波长的选择精密吸取3.0ml芦丁,余下部分按2.2项下方法操作，在紫外-可见分光光度计上，波长400～800nm扫描，确定最大吸收波长为510nm。　　2.4标准曲线与回归方程结果表明，芦丁标准溶液浓度在0.0103～0.515mg·ml-1范围

6、内，线性关系良好。得到回归方程：A=10.246C-0.075，相关系数r=0.9979。　　2.5天山花楸总黄酮含量的测定精密量取样品溶液2ml，置10ml量瓶中，余下部分按2.2项方法操作，在510nm波长处平行测定5次，同以样品空白做参比。根据回归方程，计算总黄酮浓度。根据公式：总黄酮含量=（黄酮化合物质量/样品质量）×100%，得天山花楸总黄酮含量。结果见表1。　　表1天山花楸总黄酮含量测定结果（略）　　2.6精密度实验取一定质量浓度的供试品溶液，按2.2项显色，连续测定5次。结果见表2，采用本法测定天山花楸总黄酮含量，精密度良好，其相对标准偏差RSD

7、为0.3%。　　表2精密度实验结果（略）　　2.7稳定性实验取对照品溶液及供试品溶液，按2.2项显色，于室温分别放置0，15，30，45，60min，测定对照品及供试品溶液吸光度，其RSD分别为1.3%，0.9%。表明对照品及供试品溶液在1h内稳定。结果见表3。　　2.8回收率实验精密称取已知量的天山花楸6份，分别精密加芦丁对照品适量，按2.2项下方法测定，平均回收率为98.8%，RSD为1.3%。结果见表4。　　表3稳定性实验结果（略）　　表4回收率实验结果（略）3讨论　　本法采用甲醇回流提取天山花楸中总黄酮，以NaNO2-Al(NO3)3-NaOH体系为显

8、色剂，利用分光光度法测定总黄酮，操作简